摘要:本文讨论了采用高效液相色谱测定武夷岩茶中除虫脲残留量的方法,经分析总结可知,在流动相:甲醇+
水(75+25
),流速:1.2mL/min
,检测波长:245nm
的条件下,经二极管阵列检测器(DAD
)检测分析可知除虫脲的保留时间为4.28min
,经回收率测试可得回收率在88.7%
~91.5%
之间,RSD
为3.87
~5.01
,可以符合实验要求。关键词:液相色谱;武夷岩茶;除虫脲;残留量除虫脲,又称灭幼脲,商品名敌灭灵,化学名称1-(2
,6-
二氟苯甲酞基)-3-(4-
氯苯基)
脲。 除虫脲是一种白色或浅黄色针状结晶;熔点为210
℃~230
℃[1]。除虫脲有抑制昆虫几丁质合成作用,还有明显的杀卵和不育作用因此对防治茶树鳞翅目害虫有特效,特别受到茶农朋友的亲睐[2]。除虫脲特点是杀虫范围大、药效高、用量少,毒性低,低残毒,对环境污染小,药效期长、杀虫选择性强,
可能会取代有机磷、有机氯等传统杀虫剂,
广泛应用于农业生产中。但它对人体有一定危害,如果对农作物杀虫使用不当,就会在果实、茶叶中留有较高残量,从而损害人体健康,乃至造成生命危险。现在,一些发达国家对其在食品中的残留定值为1.0-0.10mg/kg
,规定是严格的[3]。除虫脲残留量过高对人体有害,在国内外对其在食品中的残留量已有检测方法[4]-[5],而对其在茶叶中的残留量却未见有采用高效液相色谱法检测的文献报道。为弥补这一空缺,我们以有中国十大名茶之称的武夷岩茶为样品,采用高相液相色谱法,对茶叶中除虫脲残留量进行了检测方法实验。1 实验部分1.1 仪器与试剂1.1.1
仪器:Agilent Technologies 1200
高效液相色谱仪(配置自动进样器、二极管阵列检测器(DAD
));KQ-250B
超声波清洗器;RE-25B
旋转蒸发仪;THZ-98AB
恒温振荡器;紫外分光光度计;艾捷尔牌茶叶专用萃取柱(TPT
)。1.1.2
试剂:除虫脲标准溶液:纯度>99%
;甲醇和乙腈均为色谱纯;武夷岩茶样品1.2色谱条件1.2.1
色谱柱:ZORBAX Eclipse XDB-C
184.6×150mm
、5μm
,检测波长:254nm;
流动相:甲醇-
水(75+25
);流速:1.2mL/min
。1.3样品制备称取2.5g
(精确至0.001g
)的武夷岩茶粉碎混匀的试样于250ml
的具塞锥形瓶中,加入乙腈20ml
,恒温振荡1h
,提取液过滤至250ml
的另一具塞锥形瓶中,待用。先以5mL
的洗脱液自然流经茶叶专用萃取柱,再取1mL
的提取液使其自然流经小柱,流出液收集在浓缩器的梨形瓶中,再用25mL
洗衣脱液淋洗小柱,流出液并入上述梨形瓶中,经旋转蒸发仪浓缩至干,用甲醇溶解并定容至1 m L
,过0.45μm
微孔滤膜后于液相色谱仪测定。2 结果与讨论2.1 检测条件的选择通过查阅文献可知除虫脲有两个吸收波长,最大吸收波长200nm
,次吸收波长254nm
[6]。通过对除虫脲标准溶液的紫外扫描,在实际样品检测时发现200nm
波长处基线噪音大,杂质吸收强。而254nm
波长处可以避免这些情况,因此采用254nm
作为除虫脲残留分析的检测波长。2.2 线性范围用流动相甲醇-
水(
体积比为75
︰25)
配制质量浓度为0.2
~15 mg/L
的系列标准溶液,以质量浓度为横坐标,峰面积为纵坐标进行线性回归。结果表明:
除虫脲标准工作溶液的色谱峰面积与质量浓度呈线性关系,线性回归方程为Y=3.1555X+O.O884(r=0.9999)
,如图4
所示。该测定条件下除虫脲标准溶液保留时间约为4.28 min
,以3
倍信噪比计,检出限0.02 mg/kg
。2.3 回收率试验在空白样品中分别加入不同浓度的除虫脲标准工作溶液,按试验方法处理样品,在色谱条件下测定,分别计算回收率及其相对标准偏差(RSD)
,结果见表1
。所得回收率在88.7%
~91.5%
之间,RSD
为3.87
~5.01
。表1 武夷岩茶中除虫脲加标回收率测试(n=5)
除虫脲加入量(ng) | 除虫脲回收量 (mg·kg-1) | 平均回收率(%) | RSD(%) |
0.1 0.5 1.0 10.0 | 0.0915 0.4453 0.8873 8.9919 | 91.5 89.1 88.7 89.9 | 4.23 5.01 4.71 3.87 |
2.4 样品测试将产自武夷山地理标志产品保护区范围内的不同品种的武夷岩茶样品(大红袍、水仙、肉桂、奇种各一个样品)配制成测试溶液,按试验方法进行定性、定量分析。结果表明,这些武夷岩茶中均未检出除虫脲农药残留。3 结论综上所述,采用高效液相色谱检测茶叶中除虫脲农药残留量的分析方法,不仅操作简单,而且回收较高,可应用到实际的检测工作中,特别适合一些只配备高效液相色谱仪,而未能配备液质联用仪的实验室中。参考文献:[1]
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