化妆品中汞的检测方法(全自动测汞仪法)编制说明
1 任务来源
中国食品药品检定研究院(简称中检院)受国家食品药品监督管理总局药品化妆品注册管理司委托,承担《化妆品卫生规范》修订工作。辽宁省药品检验检测院向中检院申请了其中“化妆品中汞的检测方法(全自动测汞仪法)建立”项目。
2 研究背景
随着检测技术的不断进步及检验仪器的更新换代,冷
原子吸收法测汞原仪器设备显得比较落后,许多检验机构都不再使用此仪器,而全自动测汞仪法测汞越来越显示出其快速、准确、灵敏度高的优势,因此,在《化妆品卫生规范》修订之际,我们申请了全自动测汞仪替代冷
原子吸收法中原有的仪器。
3 研究现状
针对现有汞测定方法前处理时间长,仪器设备由胶管连接,易发生汞蒸气泄漏,影响测量结果准确性;氢化物原子荧光光谱法或氢化物
原子吸收法均需要在测试前将样品消解。伴随分析技术与分析仪器设备的不断进步,建立高效、环保的新型汞测定方法势在必行。新型痕量测汞仪测定化妆品中的汞,无论样品状态,均无需先对样品进行任何前处理。分析比较:传统冷
原子吸收法测汞,需要采用硝酸对样品进行消解等前处理,该方法无需任何前处理即可直接测定。从而彻底避免了汞在样品前处理过程中的损失、相互玷污和污染环境等问题,此方法实现汞的快速、准确、高灵敏度的检测,实现高效环保的检测理念。
本课题采用直接测汞仪测定化妆品中的汞,替代《化妆品卫生规范》(2007年版)中“冷
原子吸收法测定化妆品中的汞”。
4 项目完成情况
根据相关参考文献,通过调整实验条件,建立了化妆品中汞的直接测定方法。
具体情况如下:
(1)建立了《化妆品中汞的测定方法(全自动测汞仪法)》:直接称取样品于样品舟中,经自动进样器导入干燥分解炉中,进行干燥、分解、热分解的产物进入催化管催化、汞蒸气进行金汞齐反应,随后高温解析,最后在254nm处以冷原子光谱法测得的荧光值与汞含量做标准曲线,以标准曲线法计算含量。本方法的检出限为0.1ng,定量下限为0.3 ng;取样量为0.1 g时,检出浓度为0.001mg/kg,最低定量浓度为0.003mg/kg。高中低不同浓度的加标回收率均在81.5%~103.8%之间,相对标准偏差RSD≤5%,在0ng/ml~50ng/ml、0ng/ml~200ng/ml、250ng/ml~1500ng/ml浓度范围内,线性关系良好(r>0.998),满足分析检测要求。
(2)本方法起草单位为辽宁省药品检验检测院,参与验证单位分别是辽宁省疾病预防控制中心、山西省药品检验所、中国食品药品检定研究院。验证结果满足《化妆品中禁用物质和限用物质检测方法验证技术规范》(国食药监许[2010]455号), 以下简称《规范》的相关要求。
5 方法概述
5.1 仪器
DMA-80全自动测汞仪(含镍舟和石英舟)
5.2 试剂
重铬酸钾(分析纯)、硝酸(优级纯)、汞标准物质[ρ(Hg)=1000μg/ml],国家标准物质(GW08617)、高纯氧气(纯度不低于99.95%)、水为GB/T6682规定的一级水。
5.3 方法
5.3.1 标准溶液的制备
5.3.1.1 低浓度标准系列:由汞标准储备溶液[ρ(Hg)=10μg/ml]用1%硝酸依次稀释成0、1.0、5.0、10.0、25.0、50.0ng/ml标准系列。
5.3.1.2 中浓度及高浓度标准系列:由汞标准溶液[ρ(Hg)=10μg/ml]用1%硝酸依次稀释成0、50、100、150、200及250、500、750、1000、1500 ng/ml标准系列。
5.3.2 仪器参考条件:
表1 干燥及分解的时间与温度程序表
时间 (s) 温度(℃)
10 200
60 200
90 650
90 650
最低测量温度250℃,吹扫时间60s,汞齐化时间12s,记录时间30s,载气高纯氧气压力为0.4Mpa。
5.3.3 测定
5.3.3.1 依次取低浓度标准系列(5.3.1.1)各100μl于石英舟中进行测定,100μl标准溶液中汞含量分别为0、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0ng。以荧光值为纵坐标,汞含量为横坐标绘制低浓度标准曲线。依次取中浓度及高浓度标准系列(5.3.1.2)各100μl于石英舟中进行测定,100μl标准溶液中汞含量分别为0、5、10、15、20及25、50、75、100、150ng。以荧光值为纵坐标,汞含量为横坐标绘制中浓度及高浓度标准曲线。
5.3.3.2称取样品0.1g(准确至0.0001g)于事先处理好的样品舟中,由自动进样器导入干燥分解炉中,按(5.3.2)仪器参考条件进行测定。根据样品含量高低选择标准曲线。
5.3.4 计算
6 方法研究
6.1 实验样品的选择
考虑到样品的代表性,共选取了化妆品样品59批,按品种分类,膏霜类(o/w)产品11批,粉类(散粉及粉块)10批,护肤水类8批,蜡基类口红3批;BB霜(w/o)3批,洗发露4批,护发素4批,洗面奶4批,眉笔3批,睫毛膏 3 批,面膜 3 批,啫喱类3 批。质控样1批。
6.2 测量条件的建立
参考相关文献资料,通过改变干燥温度、干燥时间、分解温度、分解时间、吹扫时间、汞齐化时间、最低测量温度等测量参数,并经过一系列的实验得出最佳的测量参数(改变测量参数的实验数据见表1)。采用此参数,可以达到快速准确的分析结果。
6.3 线性及范围考察
分别取汞标准系列各100μl,在本方法所确定的条件下进行测定,以所测组分的荧光值对汞含量作标准曲线,在0ng/ml~50ng/ml、0ng/ml~200ng/ml、250ng/ml~1500ng/ml范围内线性关系良好,线性相关系数满足《规范》要求
6.4 方法检出浓度和最低定量浓度
本方法参照氢化物原子荧光光度法的检出浓度(0.002μg /g)及兼顾《化妆品卫生规范》中汞的限值(1mg/kg),检出限定为0.1ng,定量下限为0.3ng;以取0.1g样品计,本方法的检出浓度为1ng/g,最低定量浓度为3ng/g。
6.5 回收率和重复性
对不同基质化妆品进行加标分析,分别以膏霜(gs-1)、护肤水(hfs-1)、粉(fen-1)为基质,其中gs-1汞含量为0.3946ng/g、hfs-1汞含量为0.1960ng/g、 fen-1汞含量为0.4204ng/g.各测定6个平行样,计算平均回收率及重复性RSD,结果见表6~12.
6.5.1 回收率的实验与计算结果(加标1)(定量限浓度的回收率)
分别称取膏霜(gs-1)、护肤水(hfs-1)、粉(fen-1)样品各6份,分别加0.3ng汞标样进行测定。
6.5.2 回收率的实验与计算结果(加标2)(低浓度曲线上的中点回收率)
分别称取膏霜(gs-1)、护肤水(hfs-1)、粉(fen-1)样品各6份,分别加2.5ng汞标样进行测定。
6.5.3 回收率的实验与计算结果(加标3)(低浓度曲线上的高点回收率)
分别称取膏霜(gs-1)、护肤水(hfs-1)、粉(fen-1)样品各6份,分别加4.0ng汞标样进行测定.
6.5.4 回收率的实验与计算结果(加标4)(中浓度曲线上的低点回收率)
分别称取膏霜(gs-1)、护肤水(hfs-1)样品各2份,粉(fen-1)6份,分别加10ng汞标样进行测定
6.5.5 回收率的实验与计算结果(加标5)(中浓度曲线上的高点回收率)
分别称取膏霜(gs-1)、护肤水(hfs-1)样品各2份,粉(fen-1)6份,分别加15ng汞标样进行测定.
6.5.6 回收率的实验与计算结果(加标6)(高浓度曲线上的低点回收率)
分别称取膏霜(gs-1)、护肤水(hfs-1)样品各2份,粉(fen-1)6份,分别加50ng汞标样进行测定.
6.5.7 回收率的实验与计算结果(加标7)(高浓度曲线上的高点回收率)
分别称取膏霜(gs-1)、护肤水(hfs-1)样品各2份,粉(fen-1)6份,分别加100ng汞标样进行测定.
经过实验回收率在81.5%~103.8%之间,重复性RSD≤5%,都能满足《规范》要求。
6.6 精密度(日间)
将低浓度标准曲线上的高低两点分别连续测量6次,计算RSD。
日间精密度能满足《规范》的要求。低浓度汞标准样品稳定性不好。
6.7 质控样的测定
国家标准物质GBW10020(GSB-11)柑橘叶,定值日期:2007年2月,有效期:2015年1月,汞的质量分数:150±20×10-9kg/kg即0.15±0.02 mg/kg。
用氢化物原子荧光光度法测定值为0.14 mg/kg
测定结果在误差允许范围内。
6.8 实验样品分析结果
采用建立好的实验条件对样品进行分析测试,结果如表17所示。
经多家实验室比对验证数据基本一致,本方法可行。