主题：【已应助】待测样品的pI值未知，该如何选择缓冲液？

原文由 淋淋雨(v2794111) 发表:

从文献中查到采用的缓冲液为pH8.0的eCAP chiral high pH的缓冲液，但我无论从哪都没找到这种缓冲液的信息，不知道有没有大神能提供点线索？

原文由 nini2006(nini2006) 发表:
没接触过这方面，没经验，不过因为病毒是由一个核酸分子和蛋白质构成（或仅由蛋白质构成），所以估计用CZE分离的话吸附会很严重，考虑用涂层毛细管和别的分离模式吧。

原文由 CEcret(v2812644) 发表:

原文由 nini2006(nini2006) 发表:
没接触过这方面，没经验，不过因为病毒是由一个核酸分子和蛋白质构成（或仅由蛋白质构成），所以估计用CZE分离的话吸附会很严重，考虑用涂层毛细管和别的分离模式吧。

严重同意，吸附是需要解决的首要问题。可以采用商品化的涂层管或者动态涂层技术来解决这个问题。Beckman的这个buffer其实是简单的50mM Tris-HCl buffer，pH 8.0，可以自己配的。其中不包括涂层技术。你可以尝试一下看看你的病毒颗粒吸附的程度是否严重。

原文由 nini2006(nini2006) 发表:

没接触过这方面，没经验，不过因为病毒是由一个核酸分子和蛋白质构成（或仅由蛋白质构成），所以估计用CZE分离的话吸附会很严重，考虑用涂层毛细管和别的分离模式吧。

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原文由 CEcret(v2812644) 发表:

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没接触过这方面，没经验，不过因为病毒是由一个核酸分子和蛋白质构成（或仅由蛋白质构成），所以估计用CZE分离的话吸附会很严重，考虑用涂层毛细管和别的分离模式吧。

严重同意，吸附是需要解决的首要问题。可以采用商品化的涂层管或者动态涂层技术来解决这个问题。Beckman的这个buffer其实是简单的50mM Tris-HCl buffer，pH 8.0，可以自己配的。其中不包括涂层技术。你可以尝试一下看看你的病毒颗粒吸附的程度是否严重。

好的，谢谢您！您说的涂层毛细管是PVA涂层吗？我看安捷伦的产品目录只有这个涂层的毛细管。除了涂层毛细管以外，还有其他方法解决这个问题吗？

原文由 nini2006(nini2006) 发表:

原文由 淋淋雨(v2794111) 发表:

原文由 CEcret(v2812644) 发表:

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没接触过这方面，没经验，不过因为病毒是由一个核酸分子和蛋白质构成（或仅由蛋白质构成），所以估计用CZE分离的话吸附会很严重，考虑用涂层毛细管和别的分离模式吧。

严重同意，吸附是需要解决的首要问题。可以采用商品化的涂层管或者动态涂层技术来解决这个问题。Beckman的这个buffer其实是简单的50mM Tris-HCl buffer，pH 8.0，可以自己配的。其中不包括涂层技术。你可以尝试一下看看你的病毒颗粒吸附的程度是否严重。

好的，谢谢您！您说的涂层毛细管是PVA涂层吗？我看安捷伦的产品目录只有这个涂层的毛细管。除了涂层毛细管以外，还有其他方法解决这个问题吗？

除了涂层毛细管，还可以用动态涂层的方式，除此之外还可以用极端pH值法等等，抑制吸附有很多方法，你可以借鉴蛋白质的分离方法。

原文由 淋淋雨(v2794111) 发表:

原文由 nini2006(nini2006) 发表:

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原文由 CEcret(v2812644) 发表:

原文由 nini2006(nini2006) 发表:
没接触过这方面，没经验，不过因为病毒是由一个核酸分子和蛋白质构成（或仅由蛋白质构成），所以估计用CZE分离的话吸附会很严重，考虑用涂层毛细管和别的分离模式吧。

严重同意，吸附是需要解决的首要问题。可以采用商品化的涂层管或者动态涂层技术来解决这个问题。Beckman的这个buffer其实是简单的50mM Tris-HCl buffer，pH 8.0，可以自己配的。其中不包括涂层技术。你可以尝试一下看看你的病毒颗粒吸附的程度是否严重。

好的，谢谢您！您说的涂层毛细管是PVA涂层吗？我看安捷伦的产品目录只有这个涂层的毛细管。除了涂层毛细管以外，还有其他方法解决这个问题吗？

除了涂层毛细管，还可以用动态涂层的方式，除此之外还可以用极端pH值法等等，抑制吸附有很多方法，你可以借鉴蛋白质的分离方法。

我查到的几篇和我做的相同样品的文献里都用的未涂层毛细管，只是加入SDS或者腐胺作为改性剂，不知道这对解决吸附有没有帮助？

原文由 淋淋雨(v2794111) 发表:

原文由 CEcret(v2812644) 发表:

原文由 nini2006(nini2006) 发表:
没接触过这方面，没经验，不过因为病毒是由一个核酸分子和蛋白质构成（或仅由蛋白质构成），所以估计用CZE分离的话吸附会很严重，考虑用涂层毛细管和别的分离模式吧。

严重同意，吸附是需要解决的首要问题。可以采用商品化的涂层管或者动态涂层技术来解决这个问题。Beckman的这个buffer其实是简单的50mM Tris-HCl buffer，pH 8.0，可以自己配的。其中不包括涂层技术。你可以尝试一下看看你的病毒颗粒吸附的程度是否严重。

好的，谢谢您！您说的涂层毛细管是PVA涂层吗？我看安捷伦的产品目录只有这个涂层的毛细管。除了涂层毛细管以外，还有其他方法解决这个问题吗？