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主题：【求助】革兰氏染色问题之总大肠杆菌实验操作等问题

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zdriwy
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发表于：2017/05/23 10:24:45 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位前辈好！
最近练手革兰氏染色，拿江河水样，用多管发酵法和滤膜法。
两个涂片结果都是红色，表明是革兰氏阴性菌。
但有个疑问，是担心酒精脱色没把握好，导致把阳性菌变成假阴性。
想问一下各位负责总大肠菌群的前辈，你们试验中会做一个革兰氏阳性菌来对照吗？
个人觉得水体中（本人使用钱塘江水），不太可能出现革兰氏阳性菌，这种想法是不是不严谨呢。
以及CMA认证时，担心老师会要求现场操作革兰氏染色，求问，大家有什么建议，比如什么地方需要注意。
还有大家染色时都是在无菌操作台，还是只是在一般实验室，使用酒精灯保证一个无菌区呢？
问题有点多，谢谢各位先。
该帖子作者被版主 郭景祎加 2积分， 2经验，加分理由：话题
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zdriwy
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2017/5/23 10:33:35 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
还有，请问，若是有做阳性菌对照的前辈，你们阳性菌是自己购买，还是向有资源的朋友求赠的呢？
运送的方法有需要注意的吗？
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郭景祎
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2017/5/23 14:52:20 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
阳性菌株的保存条件要求较高，需要买专用的冰箱，所以我们如果阳性对照一般就是用洗手水
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zdriwy
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2017/5/23 16:54:35 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 郭景祎(guojingyi-2010) 发表:
阳性菌株的保存条件要求较高，需要买专用的冰箱，所以我们如果阳性对照一般就是用洗手水

谢谢回帖！就是麻烦能说得详细点吗？就是一般洗手的水吗？为什么能当阳性对照呢？
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郭景祎
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2017/5/24 8:11:42 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zdriwy(v3199409) 发表:

谢谢回帖！就是麻烦能说得详细点吗？就是一般洗手的水吗？为什么能当阳性对照呢？
我理解的阳性对照，是指你的实验室条件，包括培养基，能够培养出阳性菌来，只做空白的话无法证明培养基能否培养出真正的菌来，普通的洗手水，不放洗手液，就可以作为阳性对照，还是比较明显的
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脉兽
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2017/5/24 13:56:53 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
革兰氏染色在一般实验室就可以，不过总大肠菌群实验，革兰氏染色后，发酵管中的培养液不要污染，因为还要做复发酵实验。而且现在实验室都具备无菌室，在无菌室进行革兰氏染色实验也比较方便。
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zdriwy
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2017/5/25 9:47:11 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 脉兽(v3235534) 发表:
革兰氏染色在一般实验室就可以，不过总大肠菌群实验，革兰氏染色后，发酵管中的培养液不要污染，因为还要做复发酵实验。而且现在实验室都具备无菌室，在无菌室进行革兰氏染色实验也比较方便。

谢谢回复！
现在是在超净台上操作，虽然没放置在无菌室，但目前做出来结果不错。
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zdriwy
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2017/5/25 10:08:46 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 郭景祎(guojingyi-2010) 发表:
我理解的阳性对照，是指你的实验室条件，包括培养基，能够培养出阳性菌来，只做空白的话无法证明培养基能否培养出真正的菌来，普通的洗手水，不放洗手液，就可以作为阳性对照，还是比较明显的


谢谢解释！
我会尝试去做一遍！
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robinxin
robinxin
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2017/5/25 15:48:25 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
学习了，感谢各位
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