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液相色谱（LC）
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主题：【求助】做液相色谱时标准品不出峰是什么原因

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发表于：2019/06/17 16:05:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
今天做液相色谱测青藤碱的标准曲线，可是后来不出峰了。流动相-甲醇：磷酸盐（0.02mol/LNaH2PO4用磷酸调pH至3）=50:50，柱温30度，流速：1.0mL/min  检测波长：260nm，进样量：20μL，柱压130bar左右。刚开始几个标准品还有峰，但是很乱，在网上查了下，有说流动相问题的，也有说进样量过多或标准品浓度太大的。后来改用梯度洗脱，峰也不好。最后条件又重新换回等度洗脱，进样量换为10μL可是不出峰了。
不出峰的


刚开始出峰的标准品
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2019/6/17 21:27:18 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是不是标准品不纯
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2019/6/17 22:21:03 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
为什么PH要调为3呢？碱性物质在酸性调节下会电离的更加严重，而且流动相比例一般不会选择甲醇：水=50:50，因为这个比例的流动相粘度是最大的。这分析方法是标准方法还是自建的方法
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雨红星宇
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2019/6/17 22:23:57 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
刚才查了下资料，青藤碱极性比较大，你用的C18柱子？
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