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液相色谱（LC）
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主题：【已应助】关于反向高效液相色谱柱的选择和推荐

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发表于：2019/08/27 10:40:21 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
反向高效液相色谱测定盐酸多柔比星的含量
样品浓度：100ug/ml
流动相：十二烷基硫酸钠（1.44g加0.68ml磷酸加500ml双蒸水）：乙腈：甲醇=500:500:60
进样量：10ul
流速：0.7ml/min
波长：254nm
之前流速为1.0ml/min，杂质峰与主峰分离度为2.273，出峰时间约11.5min，流速改为0.7后，分离度为2.832，出峰时间约11.6min
按照这些条件已能得到较好的峰形，但现在我们老师又让我们找适合于蛋白质类药物的条件，因为我们真正要做的是蛋白质药物，而阿霉素只是试验。并且要把样品溶在PBS溶液中，我现在要怎么调整这些条件？（老师还是让我们用阿霉素来摸适合阿霉素的条件）让它的条件适合蛋白质（蛋白质在有机溶剂中容易变性），又能得到好看的峰形？
推荐答案：Ins_d5657f00回复于2024/08/28
在反相高效液相色谱（RP-HPLC）中测定盐酸多柔比星（阿霉素）的含量时，您已经找到了一组能够得到较好峰形的条件。为了适应蛋白质类药物的分析，可以尝试调整流动相、柱温、流速、进样量、检测器和色谱柱等条件。具体调整方法需要根据蛋白质的特性和分析要求进行实验验证。
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2024/8/28 14:58:41 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在反相高效液相色谱（RP-HPLC）中测定盐酸多柔比星（阿霉素）的含量时，您已经找到了一组能够得到较好峰形的条件。为了适应蛋白质类药物的分析，可以尝试调整流动相、柱温、流速、进样量、检测器和色谱柱等条件。具体调整方法需要根据蛋白质的特性和分析要求进行实验验证。
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