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主题：【求助】蛋白质检测的问题

浏览0 回复2 电梯直达
shentao69
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发表于：2019/09/09 11:43:51 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我用凯氏定氮法来做的，检测螺旋藻。取0.2-2克的螺旋藻和0.2克硫酸铜，6克硫酸钾，20ml硫酸消化，泡沫消失后直接变成了碳状物质，根本就不会出现蓝绿色透明液体，我都是直接用蒸馏水溶解后过滤的。不知道怎么回事？还有蒸馏后滴定时，颜色还是指示剂的蓝色（用的是甲基红和亚甲基蓝2：1来配置的），看不见滴定终点，不知道哪出了问题？？？？郁闷的很。我以前都没有做过蛋白质这个实验，很多地方不懂，大家指点下。谢谢了
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2019/9/11 6:20:58 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你消化处理时硫酸铜：硫酸钾：硫酸的比例不合适，处理后呈碳状就说明你的样品消解时加入的硫酸钾太多了，硫酸的沸点太高，被挥发光了，蛋白质没有消解出来，用蒸馏水溶解过滤这个操作不对，呈蓝色说明没有滴定单终点，估计你的蒸馏液有被碱污染了，整个蒸馏的管路好好洗下，直至空白值正常为止（空白消耗0.1摩尔每升的盐酸液小于0.05毫升）
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2019/9/15 15:52:07 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
建议你用0.4克硫酸铜，6克硫酸钾，12ml硫酸
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