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主题：【分享】【金秋计划】细胞复苏后出现背景脏和小黑点的原因

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发表于：2024/09/07 16:12:50 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
细胞复苏后出现背景脏和小黑点的现象是比较常见的，可能由多种原因引起。以下是一些常见原因及判断方法：

可能原因
  • 细胞碎片：在细胞复苏过程中，一些细胞可能会经历凋亡或破裂，产生碎片。这些碎片在显微镜下可能呈现为小黑点。
  • 血清沉淀：反复冻融的血清可能会产生沉淀，这些沉淀物也可能在显微镜下看到。
  • 细菌污染：细菌污染会导致培养基变浑浊，显微镜下可见快速移动的小黑点。
  • 真菌污染：真菌污染通常会在显微镜下看到菌丝或其他形态的菌体。
  • 支原体污染：支原体污染较难通过显微镜直接观察到，但可以通过PCR或荧光法检测。


判断方法

  • 运动性：观察小黑点是否运动。布朗运动的小黑点通常是细胞碎片，而细菌会有更明显的活跃运动。
  • 培养基浑浊度：细菌污染会导致培养基迅速变黄和浑浊，而细胞碎片不会。
  • 接种平板：将怀疑污染物接种在微生物培养平板中，观察菌落形成情况。
  • 显微镜观察：细胞碎片通常大小不规则，做布朗运动；而细菌污染的小黑点大小一致，快速移动。


预防措施

  • 保持无菌操作：在操作前后用75%乙醇消毒所有工作表面。
  • 减少血清冻融次数：尽量减少血清等试剂的冻融次数。


  • 定期检测：定期使用PCR或荧光法检测支原体污染。

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