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近期有不少客户来向我们反馈,在按照药典条件进行丹参中丹参酮类含量测定的过程中,分离度经常达不到要求。月旭科技今天就通过对丹参的测定,一起来寻找分离度达不到要求的原因,并且解决它!
中国药典的色谱条件:色谱柱:月旭Ultimate® Plus-C18,4.6×250mm,5μm。
流动相:
时间min | A:0.02%磷酸溶液(%) | B:乙腈(%) |
0 | 39 | 61 |
6 | 39 | 61 |
20 | 10 | 90 |
20.5 | 39 | 61 |
25 | 39 | 61 |
检测波长:270nm;
柱温:20℃;
流速:1.0mL/min;
进样量:10μL。
在与客户交流的过程中发现,客户的所有测定参数都一样,只有柱温有所区别,客户使用的柱温是35℃。那么问题究竟是不是出在了柱温上呢?
我们今天就用35℃以及20℃两种柱温进行测试,来一探问题究竟!
柱温20℃测试效果
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丹参酮IIA对照溶液
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供试品溶液
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柱温35℃测试效果
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怎么样?!是不是发现目标物合并掉了,并没有分开呢?
所以我们得到的结论就是:在按照药典条件进丹参中丹参酮类含量测定的过程中,影响分离度的主要因素是柱温。在按照药典中要求的20℃进行测试时,分离度就可以达到要求。
如果您在日常的实验中也会遇到类似的问题,包括色谱柱的使用问题,色谱柱的筛选,项目优化等等一系列的问题,均可以联系我们!我们将全心全意解决您的问题!
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