主题:【分享】【原创分享】Diamonsil(钻石二代)分析色谱柱使用说明

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A 色谱柱验收
检查外观是否完好;
检查柱子的规格型号,是否与您的需求相符;
如果您想对新色谱柱的性能进行测试,可以按照柱性能测试报告上的条件进行测试。




B 色谱柱安装
该色谱柱与外径为1/16英寸的PEEK管线或不锈钢管线完美匹配;
为减小死体积,柱前和柱后的管线内径应不超过0.01 英寸(0.25 mm)
如果您使用的是PEEK管线,您应选择PEEK接头使管线与色谱柱连接;如果您使用的是不锈钢管线,您可以选择PEEK接头或不锈钢接头,当使用不锈钢接头时,应确保管线与柱头紧密结合后再固定韧环,这样可以防止管线与色谱柱连接处产生死体积。




C 对流动相的要求
该反相色谱柱,可以使用水或有机溶剂作为流动相,并且为了特殊需要还可以在流动相中加入酸、碱、盐;
该色谱柱不能耐受纯水或纯水溶液,流动相中有机相的比例不应低于5%
该色谱柱的pH值耐受范围为1.5-9.0,流动相的pH值不应超过这一范围,否则色谱柱性能和寿命会受到影响;
对于缓和流动相,应确保不同溶剂间的良好互容,以免影响分析结果;
对于有机溶剂-缓冲溶液体系,应确保缓冲盐不会析出;
不同流动相的黏度有差别,使用不同的流动相时,色谱柱产生的压强会有差别;使用水(包括缓冲溶液)-乙腈体系时,乙腈含量为20%时产生的压强最大;使用水(包括缓冲溶液)-甲醇体系时,甲醇含量为50%时产生的压强最大;Diamonsil 2的最高承受压强远高于反相模式下可能产生的最高压强;
10-40 °C之间,使用较高的柱温能够降低色谱柱压强并改善分离效果;
用于流动相配制的溶剂应为HPLC级或更高级别,作为添加物的酸、碱、盐尽量使用HPLC级别;
色谱柱入口和出口安装了2 μm筛板,为避免色谱柱堵塞,流动相应经0.45 μm滤膜或孔径更小的滤膜过滤;
流动相应该有效脱气后再使用,以避免在系统中产生气泡导致的泵和检测器不稳定;
纯水或缓冲盐水溶液易滋生微生物造成流动相污染,纯水或缓冲盐水溶液作为流动相组分时,24小时内应更换新的溶液。




D 转换流动相的注意事项
您收到的色谱柱是保存在65%乙腈水溶液中的,使用前建议您用甲醇或乙腈对新色谱柱进行活化冲洗;
纯有机溶剂或有机溶剂含量较高的流动相与含缓冲盐的流动相变换,不应直接替换,两者之间应使用10%甲醇水溶液或10%乙腈水溶液进行过渡,过渡溶剂体积不少于10倍柱体积;
用某一种流动相代替上一种流动相时,应确保两者互容;
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E 色谱柱保存
超过24小时的时间不使用色谱柱,最好将色谱柱保存在乙腈或甲醇中;
操作时的流动相中若无酸、碱、盐,可以用乙腈或甲醇冲洗20倍柱体积后直接封存;操作时的流动相中若有酸、碱、盐,应先用10%甲醇水溶液或10%乙腈水溶液冲洗20倍柱体积,然后再用乙腈或甲醇冲洗,然后封存;
使用随色谱柱一起的PEEK螺旋塞将色谱柱的入口和出口密封,以防止柱中溶剂挥发。




F 对样品的要求
用于进样的样品溶液须经0.45 μm滤膜或孔径更小的滤膜过滤
如果样品提取自复杂基质(比如动植物基质),最好对提取液进行适当的纯化处理,以避免污染色谱柱,影响分析效果和色谱柱寿命
安装保护柱可以防止颗粒物堵塞色谱柱,并预先吸附强保留物质,以避免其污染色谱柱。




G 色谱柱再生方法
当色谱柱压强明显升高时可对色谱柱进行再生处理;用相当于20倍柱体积的溶剂按下列次序冲洗色谱柱:10%甲醇水溶液甲醇异丙醇甲醇。该程序适用于反相色谱柱:C18, C8, PH, CN。如果色谱柱的压力升高是由颗粒杂质堵塞引起,再生处理效果不明显。




柱床体积计算方法:V=3.14*d2*L/4




d为色谱柱内径,单位为cmL为柱长,单位为cm




色谱柱规格

150 mm*4.6 mm

200 mm*4.6 mm

250 mm*4.6 mm

柱床体积

2.5 ml

3.3 ml

4.2 ml



dahua1981
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原文由 dahua1981(dahua1981) 发表:
实际使用效果还得后面的工作验证


这是 官方实验说明书

里面有几点注意事项 ( ^_^ )不错嘛
mengzhaocheng
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tangtang
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