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可能的原因有:
(1)反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解。
(2)反应条件不够优化,可适当降低退火温度或改为三步扩增法。
(3)反应体系中有PCR反应抑制物,一般是加入模板时所引入,应先把模板适度稀释,再加入反应体系中,以减少抑制物的影响。
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