1、楼主的图没有传上来,因而看不到,可以再补一下。
2、走样基线不平,这个问题考虑是否是仪器系统的问题,不管做什么分析,仪器首先要保证是状态好的,比如观察平衡时的系统压力是否有波动,如果平衡时压力波动就比较大,那不管是你的样品还是基线肯定走不好。
3、走的标品和样品出峰时间不一致,还有峰分不开,对于这种情况,我怀疑楼主走的样品本身性质也有点关系,是否测试过pH值?我看楼主走的是等度,且流动相中未加入其它物质,建议楼主在样品中加入缓冲盐,这样有利于保留时间的稳定,同时对于分离度不好,也可以考虑将等度优化为梯度。
总而言之,先在仪器本身方面下手,维护好仪器,确保仪器没有问题,排除仪器系统不稳定造成的出峰异常。然后再从分析方法本身入手进行优化,比如调节流动相,设置梯度洗脱等等。