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菜鸟与液相色谱仪之糗事(1)
我们单位的LC1260
液相色谱装机近一年了,因种种原因到现在还没有开过机,安装工程师现场培训的内容也忘的不剩下什么了。近期准备参加厂家的仪器培训,培训前想提前了解一下仪器,听课时好有针对性的去学习。想着仪器都是相通的,把仪器培训教材看上两遍,应该问题就不大了吧。理想是丰满的,现实是骨感的。现把我在学习
液相过程中的各种糗事分享给大家。
把培训教材看了两遍后满怀信心的开启了我的
液相工作模式。
配标准溶液,标准曲线的五个点应该怎么确定呢?没关系,我们有万能的“仪器论坛”,论坛上高手如云。先搜索有关配标的贴子,真的找到了,感谢“我是风儿”的认真回答。
图1:论坛查询
为节约成本,本次练习只配制了一种标准溶液---灭多威。先将100 ug/ml的标准溶液用甲醇溶液稀释成10 ug/ml,再稀释成1 ug/ml。按顺序分别吸取500 ul、600 ul、700 ul、800 ul、900 ul甲醇溶液于五个1.5ml进样瓶内,再分别吸取500 ul、400 ul、300 ul、200 ul、100 ul灭多威标液(1 ug/ml)按顺序加于上述五个1.5ml进样瓶内,配制出浓度分别为0.5 ug/ml、0.4ug/ml、0.3 ug/ml、0.2 ug/ml、0.1 ug/ml标准溶液。
图2:配制标准溶液
打开电脑,开启工作站:选择“1260II-FLD”,点击“启动”打开在线工作站。打开
液相各个模块,换好流动相,准备排气。(每次换上新的流动相、开机前、关机前都需要排气清洗)反时针旋开泵模块上的溶液排空阀
,右键单击二元泵视图空白处,选择 “方法”,设置流速为5 mL/min,A溶剂为100%,B溶剂为0%→应用→点开二元泵上的绿色开泵按钮→3-4分钟结束。右键单击二元泵视图空白处,选择“方法”,设置流速为5 mL/min,A溶剂为0%,B溶剂为100%→应用→点确定→3-4分钟结束。
一切顺利,信心大增。下一步,编辑方法。点左下角,“方法和运行控制” →点菜单栏上“方法” →点“编辑完整方法”,选择所有选项,点击“确定”→方法注释不用写,点击“确定”→选择进样源,点“确定”。依次按标准要求设置“二元泵”、“样品器”、“柱温箱”,点“确定”出现了下面界面:
图3:问题出现
这不是应该在数据分析时编辑吗?哪里出了问题?带着问题重新编辑方法,发现点“编辑完整方法”后, 不应该勾选“数据分析”选项:
图4:问题解决
编辑序列:点左下角“方法与运行控制”,点 “序列”→点“序列参数”开始设置 “路径”、“子目录”,“命名模式”。再点“序列”→点“序列表”,依次设置“样品容器位置”、“样品位置”、“样品名称”、“进样源”、“进样量”、“进样次数”→点确定。点“序列”,点“序列模板另存为”,起个名字,确定。
运行方法:点左下角“方法与运行控制”,选择刚才所建的方法,点 “序列” →点“序列表” →点“应用”。开始进样,这个时候心情是愉悦的。一个小时后来查看进样情况,发现序列表还在进第一个样品甲醇。
图5:问题
为什么不进样?向兄弟单位的一个
液相工程师询问得到如下答案:
图6:找到答案
修改方法,重新进样,样品终于出峰了。
菜鸟开
液相先告一段落,下一步继续菜鸟在数据分析中的糗事。