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液相柱的活化
由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间,因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理:
首先,配好65%乙腈/水或者纯甲醇溶剂备用,所有进入HPLC仪器的溶剂必须经过0.2um或者0.45um过滤膜过滤并脱气;
再按柱子的正确方向连接柱子进口端(连接时注意一定要把管路的端口抵紧柱子的进口以免产生死空间发生漩涡效应降低柱效), 出口端先不接检测器。
先以0.1~-0.2ml/min的流速冲洗,等看到有液体从柱子中流出后,持续10mins之后再接上检测器,以循序渐进方式将流速调至1.0ml/min(LC/MS柱子应以0.2ml/min的流速进行),继续活化2小时。