实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8092686今日发帖：2 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
液相色谱（LC）
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【已应助】标准曲线做不好

浏览0 回复21 电梯直达
Insp_c86406cd
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2020/03/27 23:06:57 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
先上方法：C18柱，5um，4.6mm*250mm，柱温30℃，0.7ml/min，进样量20uL，流动相A：5.0g庚烷磺酸钠，B：乙腈，A:B=80:20

这个方法是文献提供的，现在用同样的方法，测标准品测不准。配制了2个标准品，一个是0.8mg/ml，一个是0.86mg/ml，用峰面积相互

算含量，误差超过10%！然后又从0.46mg/ml到10.2mg/ml之间做了5个点，每2个点相互算含量误差都超过10%！

对照文献发现，同样的样品浓度和进样量，文献的峰高有600多mAU，我的只有不到100。我做的标准品比文献多一个峰，要命的是后面那个

小峰的分离度只有0.9左右。紫外检测器氘灯已经使用5100多小时。

请问，分离度不够和标准品互相测不准是因为氘灯能量不够的原因吗？这个还挺重要的，因为换个氘灯不便宜，要是申请换了氘灯还测不准，

跟领导不好交代（扣空白基线试过了，误差还是超过10%）。图在后面回帖用手机发。
推荐答案：sdlzkw007回复于2020/03/28
首先是保留时间与文献相差太大，其次是仪器响应太低，需要通过萘标准溶液（购买）核查一下仪器是否满足要求。第三是需要更高柱效的分离色谱柱对照试验。
该帖子作者被版主 轶辰加 3积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 液相色谱(LC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
相关阅读
Insp_c86406cd
Insp_c86406cd
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2020/3/28 10:01:27 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
图一是文献的图，图二是我做的
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
未来工程师
v3214185
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2020/3/28 11:07:41 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
先试试重复性如何
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
hujiangtao
hujiangtao
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2020/3/28 11:17:06 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
柱子也是和文献一样的吗？也有可能是标准品不纯的原因
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
Insp_c86406cd
Insp_c86406cd
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2020/3/28 11:36:49 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 未来工程师(v3214185) 发表:先试试重复性如何
重复性做过两次，一次是峰面积相差0.9%，一次差0.4%
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
Insp_c86406cd
Insp_c86406cd
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2020/3/28 11:38:44 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:柱子也是和文献一样的吗？也有可能是标准品不纯的原因
色谱柱规格参数一样的，都是c18，品牌不一样的。
我们领导的意思标准品纯度不需要那么高，我们只是要那个峰的面积，其它杂质不影响目标峰面积。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
hujiangtao
hujiangtao
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2020/3/28 11:40:15 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Insp_c86406cd(Insp_c86406cd) 发表:色谱柱规格参数一样的，都是c18，品牌不一样的。我们领导的意思标准品纯度不需要那么高，我们只是要那个峰的面积，其它杂质不影响目标峰面积。
现在的问题是可能杂质干扰测定了，把有机相比例降低一些看看能不能把干扰分开
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
Insp_c86406cd
Insp_c86406cd
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2020/3/28 11:41:23 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:现在的问题是可能杂质干扰测定了，把有机相比例降低一些看看能不能把干扰分开
好的，周一试试
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
Insp_c86406cd
Insp_c86406cd
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2020/3/28 11:42:47 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:现在的问题是可能杂质干扰测定了，把有机相比例降低一些看看能不能把干扰分开
如果是杂质干扰的话，为什么同一个标准品配制的两个样品会互相测不准？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
hujiangtao
hujiangtao
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2020/3/28 11:44:30 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Insp_c86406cd(Insp_c86406cd) 发表:如果是杂质干扰的话，为什么同一个标准品配制的两个样品会互相测不准？
可能后面峰干扰，仪器走别的组分精密度怎么样
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
Insp_c86406cd
Insp_c86406cd
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2020/3/28 11:45:24 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:可能后面峰干扰，仪器走别的组分精密度怎么样
这个没试过。一般液相峰面积的重现性是要求多少的？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 标准曲线做不好
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁