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主题：【已应助】葡聚糖凝胶色谱柱G10

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gaolingtan
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发表于：2021/11/30 16:18:04 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在采用G10凝胶色谱柱做头孢类聚合物检测过程中，依据药典方法，采用水做流动相进样葡聚糖2000时出现如下肩峰/峰分叉的情况；

期间有更换新色谱柱、采用0.5mol/L的NaOH及0.5mol/L的NaCl混合溶液对色谱柱进行再生处理、新配置葡聚糖2000、甚至尝试采用屈臣氏蒸馏水作为流动相均未得到改善。这会是什原因引起的呢？

推荐答案：初心回复于2021/12/01
柱效降低了，建议用温水冲洗1h，然后以水为流动相，低流速冲洗过夜试试
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2021/11/30 16:57:20 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以降低一下浓度试试
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mingxiaoyan
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2021/11/30 17:00:46 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
柱容量下降也会造成这种情况，既然更换新柱子也没改观，主要还是考虑浓度的问题
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歌名
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2021/11/30 17:02:32 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该是有几个物质没分开，尝试梯度洗脱，乙腈和磷酸缓冲盐做流动相，流速稍微降低一点点，0.5-0.8ml/min左右
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hujiangtao
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2021/11/30 21:16:21 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可能几种组分没分开
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初心
m3170710
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2021/12/1 6:49:05 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
柱效降低了，建议用温水冲洗1h，然后以水为流动相，低流速冲洗过夜试试
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gaolingtan
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2021/12/6 8:33:08 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 歌名(Ins_eedcdc41) 发表:
应该是有几个物质没分开，尝试梯度洗脱，乙腈和磷酸缓冲盐做流动相，流速稍微降低一点点，0.5-0.8ml/min左右
这个目前标准已定，且是药典方法。流速就是0.5ml/min，进的样品是葡聚糖2000，
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gaolingtan
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2021/12/6 8:34:48 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 初心(m3170710) 发表:
柱效降低了，建议用温水冲洗1h，然后以水为流动相，低流速冲洗过夜试试
这个我有试过，峰型没有得到改善  还换用新柱进样也是一样没有变化
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gaolingtan
Ins_ba872510
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2022/5/31 10:43:20 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
发现这个浓度还挺大的，1.5mg/ml。但这是药典方法  之前也没出现此类现象，就在后续稳定性检查时发现，期间有尝试更换其他厂家G-10色谱柱，即便1.5mg/ml也能得到很好的峰型，但是再次采用跟换后色谱柱做相关研究时又会出现“类似肩峰”现象
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谱祥姜工
v3251608
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2024/2/5 11:25:02 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
色谱柱什么规格的？重新调配蓝葡，看下蓝葡的日期
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