因为接触
液相全靠文献,不太懂一些hplc的细节。
跑了好久的hplc,用的是安捷伦1260 infinitlly ②
流动相:5mM醋酸铵;甲醇
检测器:400nmVWD(因为VWD检测器样品一直没有信号,所以就串联了FLD检测器)
色谱柱:C18反相色谱柱125*4mm, 5um
标品:因为极性小,用了DMSO溶解
样品:酶液中提取,提取剂为酸性丙酮;乙醇DMSO冰醋酸;(两种提取方法均来自于文献)
目前拿这个样品跑过up
LCMSms,样品中肯定含有PPIX。
问题:为什么标品能正常出峰而样品只能出heme的峰,没有PPIX的峰?是前处理的问题吗?过膜会截留PPIX嘛?又或者是其他问题?在这里寻求各位的帮助!谢谢了!
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