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液相色谱（LC）
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主题：【新手求助】液相色谱分离人参皂苷

浏览0 回复9 电梯直达
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发表于：2024/07/01 21:04:06 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
悬赏金额：10积分 状态： 未解决
我现在做的就是四元低压梯度泵，没有Waters和二元高压梯度泵的稳，比如同样一起测试样品人参皂苷Rg1  Re  Rb1，流动相是乙腈和磷酸水，同样的梯度条件，那两台机很快就出结果了，四元低压梯度泵要调整乙腈的比例才分离的出来。
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2024/7/2 13:46:29 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
四元低压梯度泵是不是通道设置错误或梯度准确度不行了，换通道试试
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等一个晴天
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2024/7/2 20:00:18 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
梯度方法确实是二元高压泵做得比较稳，四元泵也是可以做的， 出峰时间可能有一点差异，但是不会不出峰，排查一下梯度方法有没有设错
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液相色谱柱修复
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2024/7/3 14:47:24 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
混合原理不一样，所以效果不一样
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Ins_d66b2375
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2024/7/11 9:23:23 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
四元低压梯度泵是不是通道设置错误或梯度准确度不行了，换通道试试
四元低压梯度泵是使用的比例阀,A泵是乙腈,B泵0.1%磷酸水,可能0.1%磷酸水浓度浓了,所以比例不对。
现在出峰是正常的，就是要改乙腈比例让它控制在37分出峰，很难控制的。
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2024/7/11 9:27:39 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 液相色谱柱修复(Ins_9070be6a) 发表:
混合原理不一样，所以效果不一样
是的，因为高压泵不容易有气泡，要比低压泵稳定的多，四元低压泵是使用的比例阀，比例不对，因为磷酸水浓度浓，混合不均匀。
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2024/7/11 9:29:17 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 等一个晴天(m3170710) 发表:
梯度方法确实是二元高压泵做得比较稳，四元泵也是可以做的， 出峰时间可能有一点差异，但是不会不出峰，排查一下梯度方法有没有设错
出峰正常,就是要控制出峰时间在37分,难控制
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2024/7/11 9:30:58 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 等一个晴天(m3170710) 发表:
梯度方法确实是二元高压泵做得比较稳，四元泵也是可以做的， 出峰时间可能有一点差异，但是不会不出峰，排查一下梯度方法有没有设错
可能跟通道没人关系,应该是磷酸水的浓度太浓了
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有水有渝
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2024/7/13 14:14:11 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Ins_d66b2375(Ins_d66b2375) 发表:
四元低压梯度泵是使用的比例阀,A泵是乙腈,B泵0.1%磷酸水,可能0.1%磷酸水浓度浓了,所以比例不对。
现在出峰是正常的，就是要改乙腈比例让它控制在37分出峰，很难控制的。
可以按液相色谱的检定规程做一个梯度准确度的验证，看看准确与梯度延迟时间，确认一下问题出在哪里，还要对比时不同仪器上用的是不是同一款色谱柱也有关系
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Ins_d66b2375
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2024/7/13 16:35:00 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
可以按液相色谱的检定规程做一个梯度准确度的验证，看看准确与梯度延迟时间，确认一下问题出在哪里，还要对比时不同仪器上用的是不是同一款色谱柱也有关系
谢谢您的回复,已经测试出来结果了。 
与其他两台泵用的色谱柱是一样的型号的,梯度准确验证这个我不知道是怎么做的！
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