主题:【求助】NH4柱子基线一直不稳定,有杂峰

浏览0 回复7 电梯直达
sysun2005
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急问用氨基住分析代谢物,流动相是A:20mM乙酸氨,20mM氢氧化铵,95:5=ACN:water;B:纯ACN。梯度是B:85%,t=0;0% t=15min;0% t=28min;85% t=32min;85% t=40min.基线一直跑不稳,从5min起就有杂峰,而且基线波动在2-4mv之间。我用的是岛津的HPLC系统。这是问什么啊??谢
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已腈梯度就是很容易产生小杂峰的,我平时就不管它。
Mix_Grey
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如果在低波段,如210nm,在梯度变化区域,乙腈梯度会产生小的峰.如果调节波段到260nm以上就不会有鬼峰了.
sysun2005
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谢了,不过我是在254nm下测的,基线波动在3mv左右,这也算正常吗,如果想测的代谢物含量很低,岂不是无法检测和积分了。
xiaomity
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你这个流动相比例造成了固定相水解严重.普通氨基柱是会报废的
sysun2005
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不会吧,我用的是Luna氨基柱,感觉A流动相里添加两种NH4试剂,应该不会严重水解吧,另外要真是水解话,就会造成基线有很多杂峰吗?实在不懂啊!!
sysun2005
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原文由 sysun2005 发表:
不会吧,我用的是Luna氨基柱,感觉A流动相里添加两种NH4试剂,应该不会严重水解吧,另外要真是水解话,就会造成基线有很多杂峰吗?实在不懂啊!!


下面是按照这个梯度在260nm下得到空白(超纯水)进样的怪图,有很多鬼峰,而且每次都是这样

空白样品的鬼峰图
sysun2005
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