惠普4890D型气相色谱仪标准操作程序1. 范围:阐述 4890D型
气相色谱仪标准操作程序及有关注意事项,以确保测量数据的准确性。2. 责任:仪器操作员。
3. 准备:
3.1 仪器组成:
—4890D色谱仪有气路系统—进样系统—柱分离系统—检测系统—温控系统—数据处理系统(SP4290型积分仪)
3.2 仪器和性能要求:
3.2.1
气相色谱法分析固态及液态样品时,是在加温状态下使样品处于气态,在载体上的固定液和载体间进行分配分离的。加温系统耗电量大,故需有10~15A的电源,仪器接地必需良好。
3.2.2 气路系统:除另有规定外,载气常用氮气。纯度要求99.9%以上,用钢瓶时应装减压阀以控制载气稳定。
3.2.3 进样系统:用微量注射器进样,进样操作前后一致保证进样准确性和重复性。进样口温度应高于柱温,进样量一般不超过数微升。
3.2.4 柱分离系统:色谱柱为毛细管色谱柱,其规格为15m×0.53mm。新柱子要老化, 除去残留溶剂及低分子量聚合物,老柱也要定期老化(避免出现基线漂移、色谱峰拖尾)以除去杂质。
3.2.5 检测系统:药品分析常用检测器为火焰离子化检测器(FID)。该检测器需用三种气体:载气,氢气和空气。其中,氢气由SPQF—2氢气发生器电解饱和KOH所得,用Ⅲ—WJK型无噪音净化空气源提供所需的空气。检测器温度一般高于柱温并不得低于100℃,这样可使氢在检测器中燃烧生成水,逸出检测器,否则色谱基线将不稳定。
3.2.6 温控系统:HP4890D的温度设置需要接通电源后通过键盘输入。
3.2.7 数据处理系统(SP4290型积分仪基本参数设定):
SP4290型积分仪具有三功能键盘,每个键下方为功能,左上方为数字及标点符号,右上方为字母,操作时根据需要按“SHIFT”变换功能。
—积分仪自动打印出DATE和TIME字样后,按MO/DA/YR(月/日/年)及HH:MM:SS(时:分:秒)的格式,输入日期和时间,输入完毕后按“ENTER”。—系统平衡后,按“PT EVAL”(峰阀值),打印出的数字应在12~500之间,如超过,表示基线漂移,或在该时间内有峰流出,或检测器的灵敏度太高。—按“ATTEN”键,输入色谱图衰减参数,再按“ENTER”键。—按“CHTSP”键,输入色谱图纸速值,再按“ENTER”键。—以上输入的参数与积分仪内存中其它参数预设值,可以满足一般的色谱分析。如欲进行大量同一样品的自动分析,这可按“DIALOG”(对话),通过人机对话方式输入所需参数。
3.3 操作前准备:
3.3.1 色谱柱的安装:柱箱内有两个检测器接口、两个进样器械接口,根据色谱柱外形可使用任何一对检测器进样器接口。各接口均配有1/4和1/8英寸套管,可根据色谱柱的外径选用。金属柱选用金属垫圈,玻璃柱选用石墨垫圈。在火焰离子化检测器上安装毛细管柱:
—将铜制螺母和石墨垫圈装到套管/连接器上。—将连接器尽可能深地插入检测器底部。—保持住这个位置用手拧紧螺母,用扳手再旋1/4圈。—轻轻地将柱尽可能深地插到检测器底部(约40mm),到底后,不要再强行插入,随后将垫圈和柱螺母拧上去。—用手拧紧螺母,将柱撤出约1mm,然后用扳手再拧1/4圈。
3.3.2 气体流量的调节:
—载气:将皂膜流量计连到检测器出口,关掉氢气和空气,将载气钢瓶出口压罗调至0.5MPa,调节载气流量调节阀以得到合适的流量。一般情况下载气流速可选25ml/min。—氢气:打开SPQF—2氢气发生器,调节出口压力为130KPa。—空气:打开Ⅲ—WJK型无噪音净化空气源,调节压力为250KPa。
4. 操作步骤:
4.1 开起载气瓶上总阀门,调节减压阀至规定压力。
4.2 接通电源,打开SPQF—2氢气发生器和Ⅲ—WJK型无噪音净化空气源,再打开HP4890D色谱仪及SP4920积分仪。
4.3 温度设置:
—柱温(如50℃):按下面顺序输入:“OVEN TEMP”,“5”,“0”,“ENTER”—进样器温度(如55℃):按下面顺序输入:
“INJA TEMP”(或“INJB TEMP”),“5”,“5”,“ENTER”
——检测器温度:(如250℃):按下面顺序输入:“DETA TEMP”(或“DETB TEMP”),“2”,“5”,“0”,“ENTER”
4.4 程序升温的设置:
——按以下顺序依次输入:
“INIT TEMP”,“5”,“0”,“ENTER” (初始温度为50℃)“INIT TIME”,“2”,“ENTER” (初始温度保持时间为2分钟)“RATE”,“2”,“0” ,“ENTER” (加热速率为20℃/min)“FINAL TEMP”,“1”,“0”,“0”,“ENTER” (最终柱温为100℃)“FINAL TIME”,“7” ,“ENTER” (最终温度下保持7分钟)详细操作请参考操作手册。
4.5 检测器的连接与点火 —当检测器温度达到设定值时,按下面顺序连接: “DET”,“A”(或“B”),“ON” 打开氢气和空气开关阀,按“PRESS”点火。当红色“NOT READY”指示灯熄灭后,表明各加热单元均已达到设定值。
4.6 SP4920积分仪上输入日期,时间,AT(衰减)值,CS(纸速)值,待稳定一段时间后,测PT值。
4.7 调零点:当PT值在允许范围内时,按“SIG1”(或“SIG2”)查看信号值(如24.2),根据此值按“ZERO”,“2”,“4”,“.”,“2”,“ENTEN”,使信号值与零点值相近。
4.7 进样:
用微量注射器吸少量样品后,针头刺破气化室进样口的密封硅橡胶垫,将液体样品快速推进气化室,同时按下色谱仪上的“Start”键和积分仪上的“INJA”键。三盏黄色显示灯按升温程序显示柱温状态,待灯全部熄灭后,按积分仪上的“ENTER”键,结束分析。
5. 关机:5.1 按下列键以关掉各加热单元:
“OVEN TEMP”,“OFF”;“INJA(或B)”,“OFF”;“DET A(或B)”,“OFF”。
5.2 待各加热单元冷却后,把HYDROGEN、AIR分别旋转到OFF处,关掉氢气、空气。
5.3 关掉主机电源,关闭SPQF—2氢气发生器和Ⅲ—WJK型无噪音净化空气源,再关闭氮气阀。
6. 注意事项:
为了达到进样重复性,在进样操作时必需注意:
—要用同一根微量注射器进样。—由于液体进样是用注射器刺破胶垫注入有较高温度的气化室,针头内液体会因受热膨胀挤入气化室中,故每次进样操作应该一致,用同样方法和速度进样。以保证进样和准确和重现性。—使用前应检查注射器针头光滑性,使用后必须及时清洗干净。