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液相色谱（LC）
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主题：【求助】反相高效液相色谱出峰顺序

浏览0 回复17 电梯直达
wustgzw
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发表于：2008/05/18 11:21:47 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
悬赏金额：20积分 状态： 已解决
书上说，RHPLC出峰顺序是：极性大的物质先出峰，极性小的物质后出峰。
请问，RHPLC与物质的分子量有必然的联系吗？

    最近做了一次分析，采用相同色谱条件：C18的柱子，甲醇/水=38：62，0.1M硫酸锂的流动相！发现萘比萘磺酸先出峰。个人认为极性顺序应该是萘＜单萘磺酸＜萘二磺酸，理论上出峰顺序应该是：萘二磺酸，单萘磺酸，萘。
    实际与理论不符，哪位高手能给解释一下，谢谢！~~

推荐答案：luoxiandong回复于2008/05/28
键合作用力zhi的是固定相对组分的保留能力,就是拉住它的能力,和组分的功能团有关;而分配作用是分配在流动相和固定相中的组分的多少kpa,与组分的溶解特性有关.在经典液相分析中常提到的替换效应和竞争效应
补充答案：

活到九十 学到一百回复于2008/05/18

出峰顺序和组分的性质是有很大关系，但也不能忽略流动相的比例、组成及PH等因素。如果流动相的比例、组成及PH发生变化，也有可能导致出峰顺序发生变化。

立静致远回复于2008/05/18

另外还与分子量有关系

阿du回复于2008/05/18

跟流动相以及PH都有很大关系，出峰顺序是多种因素共同造成的结果，不可仅凭单一条件来判断。

tanggangfeng回复于2008/05/19



大多情况是这样的， 但有时流动相，ph 的不同也，顺序有时会变，还有不同厂家，健合技术不同的c18也会出现这种情况！

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2008/5/18 12:54:41 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
出峰顺序和组分的性质是有很大关系，但也不能忽略流动相的比例、组成及PH等因素。如果流动相的比例、组成及PH发生变化，也有可能导致出峰顺序发生变化。
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立静致远
christe
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2008/5/18 14:22:10 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
另外还与分子量有关系
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风烟
fy32501
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2008/5/18 22:50:52 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
像我们做糖分析时是单糖先出峰,后面的就是二糖再后是多糖.
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Last edit by fy32501
阿du
duliuhui
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2008/5/18 23:15:32 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
跟流动相以及PH都有很大关系，出峰顺序是多种因素共同造成的结果，不可仅凭单一条件来判断。
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tanggangfeng
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2008/5/19 18:53:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wustgzw 发表:
书上说，RHPLC出峰顺序是：极性大的物质先出峰，极性小的物质后出峰。
请问，RHPLC与物质的分子量有必然的联系吗？

    最近做了一次分析，采用相同色谱条件：C18的柱子，甲醇/水=38：62，0.1M硫酸锂的流动相！发现萘比萘磺酸先出峰。个人认为极性顺序应该是萘＜单萘磺酸＜萘二磺酸，理论上出峰顺序应该是：萘二磺酸，单萘磺酸，萘。
    实际与理论不符，哪位高手能给解释一下，谢谢！~~



大多情况是这样的， 但有时流动相，ph 的不同也，顺序有时会变，还有不同厂家，健合技术不同的c18也会出现这种情况！
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风烟
fy32501
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2008/5/19 20:55:04 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
学习了……
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luoxiandong
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2008/5/20 0:24:08 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
从色谱的分离上说,包括键合和分离两个过程,保留时间取决于固定相和流动相的作用.C18 是中等极性柱,根据流动相的极性可做正向柱也可以作反向柱.
无论是作正向还是反向柱时,对组分的作用要考虑"流动相对组分的洗脱强度"和"组分在固定相和流动相中的分配比".
因为C18是中等极性柱,分析组分的极性是否大于固定相极性?在组分的极性大于固定相极性时说极性大的组分先被洗脱是基本正确的;而在组分的极性小于固定相极性时说极性大的组分先被洗脱是不正确的.加上上面说到的流动相性质的影响,所以我觉得笼统的说RHPLC极性大的先流出是不负责任的.
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luoxiandong
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2008/5/20 0:37:33 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
键合和分配在不同的条件下的影响不同,
在键合作用力占主要地位时(组分在两相的分配差不多),极性原则是成立的.
在分配作用力占主要地位时(固定相对组分的键合作用差不多),极性原则不成立.
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ssfish
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2008/5/21 14:23:00 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很多因素影响，不能单从物质极性判断出峰顺序
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2008/5/22 22:24:34 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 luoxiandong 发表:
从色谱的分离上说,包括键合和分离两个过程,保留时间取决于固定相和流动相的作用.C18 是中等极性柱,根据流动相的极性可做正向柱也可以作反向柱.
无论是作正向还是反向柱时,对组分的作用要考虑"流动相对组分的洗脱强度"和"组分在固定相和流动相中的分配比".
因为C18是中等极性柱,分析组分的极性是否大于固定相极性?在组分的极性大于固定相极性时说极性大的组分先被洗脱是基本正确的;而在组分的极性小于固定相极性时说极性大的组分先被洗脱是不正确的.加上上面说到的流动相性质的影响,所以我觉得笼统的说RHPLC极性大的先流出是不负责任的.


谢谢！术业有专攻 ......
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