主题:【求助】请教这个物质用什么液相条件走呢?急死了

浏览0 回复13 电梯直达
amigo365
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵



大家好!
我最近实验遇到一个这样的物质,用甲醇/水的流动相走,没有正常的峰出现;用乙腈/水也是这样;波长试过254,285,300,330,360;都是这样。不知道该加缓冲盐,还是怎么弄,我开发方法没有什么经验!请大家指教!
为您推荐
您可能想找: 液相色谱(LC) 询底价
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
风烟
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
xinghuazhong888
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
先要做一个紫外扫描看看有确定波长,再看看他的溶解性,
amigo365
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
没有全波长紫外扫描的家伙!
另外我试过的也不少了
我怀疑是流动相的问题
就是不知道从哪里下手
amigo365
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 xinghuazhong888 发表:
先要做一个紫外扫描看看有确定波长,再看看他的溶解性,


这个样品易溶解于乙酸乙酯
跟甲醇溶解性不好
guohua
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
最好用分光光度计扫描一下图谱,如果没有可利用UV检测器的波长扫描功能,看一下最大吸收,然后再摸条件;当然了,有了DAD检测器一切都简单了。
84362066
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
没有分光光度计 你去网上找找看看他的吸收波长,波长不确定你怎么调流动相也没有用阿
hrcren
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
建议楼主做以下动作:
1、寻找合适的流动相和溶剂
  看你这个物质的结构和你现在的实验情况,这个物质应该是亲油大过亲水,不知道你用的流动相中水的比例是多少,建议增加有机相的比例或者用纯有机溶剂做流动相;至于溶剂,最好是用流动相,实在不行,也要找一个能与流动相互溶的溶剂,免得样品在流动相里面析出,堵塞柱子
2、确定最大吸收波长
  确定最大吸收波长,一般是用全波段紫外连续扫描,若楼主没有全波段连续扫描,看有没有紫外分光光度计,若有,可取样品溶于上一步确定的溶剂中,于分光光度计上测定吸光度,波长从最小波长一直调整到最大波长,每1nm测一个吸光度数据,这样也相当于一次全波段扫描了,取吸光度最大的那个波长作为测量波长,只是这样做太麻烦了一些,不过也不失为一种方法;如若楼主连紫外分光也没有,那就只有在HPLC上一个波长一个波长的试了,这样做比上一个方法更麻烦,若果真这样,那还不如送样出去扫连续的紫外
3、改变样品浓度
  有可能是你的样品浓度太稀了,可在样品溶解度范围内适当加大样品浓度,看看是否有改善
4、加点三乙胺试试
  这本是改善碱性物质拖尾峰的办法,对你这种情况可能不适用,但我担心可能是峰浓度太小,被拖尾拖掉了,这一条只作参考

amigo365
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 hrcren 发表:
建议楼主做以下动作:
1、寻找合适的流动相和溶剂
  看你这个物质的结构和你现在的实验情况,这个物质应该是亲油大过亲水,不知道你用的流动相中水的比例是多少,建议增加有机相的比例或者用纯有机溶剂做流动相;至于溶剂,最好是用流动相,实在不行,也要找一个能与流动相互溶的溶剂,免得样品在流动相里面析出,堵塞柱子
2、确定最大吸收波长
  确定最大吸收波长,一般是用全波段紫外连续扫描,若楼主没有全波段连续扫描,看有没有紫外分光光度计,若有,可取样品溶于上一步确定的溶剂中,于分光光度计上测定吸光度,波长从最小波长一直调整到最大波长,每1nm测一个吸光度数据,这样也相当于一次全波段扫描了,取吸光度最大的那个波长作为测量波长,只是这样做太麻烦了一些,不过也不失为一种方法;如若楼主连紫外分光也没有,那就只有在HPLC上一个波长一个波长的试了,这样做比上一个方法更麻烦,若果真这样,那还不如送样出去扫连续的紫外
3、改变样品浓度
  有可能是你的样品浓度太稀了,可在样品溶解度范围内适当加大样品浓度,看看是否有改善
4、加点三乙胺试试
  这本是改善碱性物质拖尾峰的办法,对你这种情况可能不适用,但我担心可能是峰浓度太小,被拖尾拖掉了,这一条只作参考





谢谢hrcren的热心相助!我用甲醇/水的比例为80:20,乙腈/水的比例为80:20.也可能是我进样的浓度太低,也可能是波长就没有选对,所以什么像样的峰行都没有。我再找找相似的物质吧!希望能找到!
qinxin
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 amigo365 发表:



大家好!
我最近实验遇到一个这样的物质,用甲醇/水的流动相走,没有正常的峰出现;用乙腈/水也是这样;波长试过254,285,300,330,360;都是这样。不知道该加缓冲盐,还是怎么弄,我开发方法没有什么经验!请大家指教!


70%乙腈水在254nm应该有吸收的.如要样品的溶解度不好,用DMF溶解,在360nm做一下就可以看得到,你这个产品又不复杂!
nnsss
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
没有正常峰出来,多半是流动相不匹配或柱子不匹配,面包会有的
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
品牌合作伙伴