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主题：【求助】黄曲霉毒素的测定?

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qingshui
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发表于：2008/07/25 10:58:29 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
黄曲霉毒素的计算求救???
我是个刚接触ELSA检测的新手,现在出现这样一个计算问题.

我的标准曲线是以AFB1的常用对数值为横座标,以各标液A值与空白ng/ml的A值的比值为纵座标,我将样品的A值与空白ng/ml的A值的比值代入曲线后,计算结果却出现了问题.

一般我们都是由代入曲线算得的浓度值乘以×样品初定容体积乘以×样液的稀释倍数,然后再除以样品的称样量.可是按这样一算结果很大.

于是有人说,不要乘定容体积,乘0.5就是的了.我实在不懂这个0.5是从何而来,我的定容体积是5克样,定容至25ml,然后再稀释200倍再测的.



请教高手指导,我把数据用EXCEL传上来,请帮我看一下曲线是不是这样制作的,我不太懂对数曲线.
该帖子作者被版主 闲鹤野云加 2积分， 2经验，加分理由：鼓励提出问题，分享研究心得
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qingshui
gongzhuqiong
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2008/7/25 10:59:17 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
黄曲霉毒素                       

标液浓度(ng/ml)    LgC(ng/L)    A/A0               
                       
0.1    2    0.705               
0.25    2.4    0.446               
0.5    2.7    0.294               
1    3    0.215               
2    3.3    0.133               
号码    A/A0    LgC    C(ng/L)    C(ng/ml)    含量（ng/g）   
1#-1    0.433    2.508735632    322.652944    0.322652944    6.453058881    这个公式是乘以200倍然后乘以0.5.
1#-2    0.419    2.54091954    347.471781    0.347471781    347.471781    这个是乘以25ml定容体积,结果偏高.
                        除的5是称样量,单位是g.
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qingshui
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2008/7/25 11:06:32 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我不会用EXCEL传图,把图拷到WORD里面的.
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闲鹤野云
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2008/7/26 1:10:32 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
于是有人说,不要乘定容体积,乘0.5就是的了.我实在不懂这个0.5是从何而来,我的定容体积是5克样,定容至25ml,然后再稀释200倍再测的.

你最终的浓度与总体的稀释倍数有关的:
C=200*25(mL)/5(g)/(ng/mL=浓度单位)=
这里要把克变成纳克，升变毫升。原来的浓度为纳克/升=纳克/1000mL,g=1000*1000*1000ng

另外你稀释液是用多少mL的定溶的？？？上机多少毫升？
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闲鹤野云
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2008/7/26 8:57:49 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你的计算公式不对，是200*25/5*上机浓度=300ppb左右，差不多，但比较高了。要是200*0.5*上机浓度=30ppb比较低的样品呢，是很低的污染水平。
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qingshui
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2008/8/1 9:04:58 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
您也这样认为哦,可是他们质检站非得说乘以0.5结果吻合,我都不知道怎么解释.
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qingshui
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2008/8/1 9:07:52 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
那老师的意思是按正常计算,我测得结果还是偏大,应该是操作有误差了.
第一次做,应该不能那样牵强附会的乘个0.5算了事吧.
下次有机会再做,我再好好请教您了.
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闲鹤野云
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2008/8/12 22:44:41 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 gongzhuqiong 发表:
那老师的意思是按正常计算,我测得结果还是偏大,应该是操作有误差了.
第一次做,应该不能那样牵强附会的乘个0.5算了事吧.
下次有机会再做,我再好好请教您了.

与0.5没有关系的，公式中注意稀释倍数就好。标准曲线看来还可以。稀释时一定注意枪头和移液枪的规范操作。
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闲鹤野云
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2008/8/12 22:45:13 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 gongzhuqiong 发表:
那老师的意思是按正常计算,我测得结果还是偏大,应该是操作有误差了.
第一次做,应该不能那样牵强附会的乘个0.5算了事吧.
下次有机会再做,我再好好请教您了.

与0.5没有关系的，公式中注意稀释倍数就好。标准曲线看来还可以。稀释时一定注意枪头和移液枪的规范操作。
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xiaoxiaobuyi
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2009/1/12 11:13:55 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 gongzhuqiong 发表:
黄曲霉毒素                       

标液浓度(ng/ml)    LgC(ng/L)    A/A0               
                       
0.1    2    0.705               
0.25    2.4    0.446               
0.5    2.7    0.294               
1    3    0.215               
2    3.3    0.133               
号码    A/A0    LgC    C(ng/L)    C(ng/ml)    含量（ng/g）   
1#-1    0.433    2.508735632    322.652944    0.322652944    6.453058881    这个公式是乘以200倍然后乘以0.5.
1#-2    0.419    2.54091954    347.471781    0.347471781    347.471781    这个是乘以25ml定容体积,结果偏高.
                        除的5是称样量,单位是g.

请问，已知标准品的吸光度值A/A0（0.1、0.25、0.5、1、2）以及LgC，这应该是五点，如何通过这五点来做曲线图（不用手工绘图），样品1#2#的吸光度A样品/A0，又是如何得出的？能用EXCEL或者WORD做出图形吗？谢谢
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