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主题：【求助】高效液相色谱流量的问题

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flemming
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发表于：2008/09/27 20:41:37 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
色谱柱规格; 4.6*160mm  C18  5um
流动相：甲醇-水（85：15）
样品：硝基苯的甲醇溶液（50ul/ml）
进样量：20ul
我想做峰高随不同流量的变化，流量梯度为：0.3, 0.5, 0.7, 0.9, 1.1, 1.3, 1.5ml/min。
但是，发现当流量为0.3和0.5ml/min时色谱峰比其他几个流量的峰要高，峰宽也宽，这两个流量的色谱峰的峰高相同，峰宽0.3ml/min的要宽。剩下的0.7-1.5ml/min的峰高相同，峰宽依次变窄。
我是觉得，进样量相同的情况下，峰面积应该相通啊，也就是0.3-1.5ml/min应该是色谱峰由矮胖变为高窄的吧，但我做出来却不是。
请教各位这是怎么回事啊，不胜感激！
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hmzhou83
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2008/9/28 8:55:12 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这种情况估计可能不是简单的正比例关系。
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2008/9/28 8:59:54 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 flemming 发表:
色谱柱规格; 4.6*160mm  C18  5um
流动相：甲醇-水（85：15）
样品：硝基苯的甲醇溶液（50ul/ml）
进样量：20ul
我想做峰高随不同流量的变化，流量梯度为：0.3, 0.5, 0.7, 0.9, 1.1, 1.3, 1.5ml/min。
但是，发现当流量为0.3和0.5ml/min时色谱峰比其他几个流量的峰要高，峰宽也宽，这两个流量的色谱峰的峰高相同，峰宽0.3ml/min的要宽。剩下的0.7-1.5ml/min的峰高相同，峰宽依次变窄。
我是觉得，进样量相同的情况下，峰面积应该相通啊，也就是0.3-1.5ml/min应该是色谱峰由矮胖变为高窄的吧，但我做出来却不是。
请教各位这是怎么回事啊，不胜感激！



你 的浓度恐怕早超线性了
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flemming
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2008/9/28 14:20:09 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hmzhou83 发表:
这种情况估计可能不是简单的正比例关系。


我也觉得是这样，是不是一般高液都不做流量优选的，我是个新手，不止是否需要做这个。
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2008/9/30 9:21:58 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
对于4.6*250MM的柱子,1.0ML/MIN就是最佳的流速,
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