原文由 03yx2 发表:
大家图谱来找茬(第二季)
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要求:1.找出图谱中存在的问题(越多越好噢!)
2.图谱中一个主要问题是基线漂移(在图谱两端基线很平,中间峰却漂移的很大,最小漂移为50左右,最大的有150).
针对峰的漂移你有什么好的建议嘛?
3.如果要对图中的两个峰(图谱中峰1、峰2)进行含量测定,你觉得应该怎样改善条件才可以更好的进行定量分析.
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目的:研究某一个厂家注射液的指纹图谱。
色谱条件为:Eclipse XDB-C18(ODS-2,250×4.6 mm,5 μm),甲醇-5%乙酸梯度洗脱,温度:25℃,检测波长:284nm;流速1.0ml/min.进样量:10ul.
检测样品:某厂复方注射剂.
梯度表如下:
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图谱如下:
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首先要说的是你的这张图谱做的真的不敢恭维!好的指纹图谱是几乎每个峰都能基线分离的,大部分能定量,也叫定量指纹图谱。
看你的谱图你使用的仪器应该是岛津或者Agilent,岛津的可能性要大些,关键的问题以下有几个:
1、你的样品前处理有问题,溶剂噪音很大,最好改用流动相最初始比例的溶剂溶解,这样会消除2 min的溶剂峰
2、看你的色谱图和流动相,你使用的高效
液相色谱仪检测器不适合这个样品指纹图谱分析,中药复杂成分的指纹图谱最好使用Waters的2996DAD检测器,含1024光电倍增管,而你使用的Agilent或是岛津的DAD对复杂成分紫外可见响应值有问题(我自己多次遇到这样的问题,最后对比上述三家公司仪器得出的结论),建议最好使用Watersd的2996DAD检测器。这样建议的;理由是该检测器在Empower工作站里很方便查看各色谱峰的紫外吸收,从而为指纹图谱的波长选择留下很大余地,换可以选择二维指纹图谱。
3、该色谱柱不适合该样品的指纹图谱,试试Agilent或luna的柱子
4、如楼上各家所见,有机流动相建议使用乙腈,背景噪音会小很多
5、流动相条件太复杂,考虑到重复性等,差不多2-4步梯度变化就可以了
注意了以上的这些后,再对各色谱峰进行流动相的梯度优化,然后就要靠经验了,需要的话可以联系我QQ332806956 niaimin215@163.com