主题:【求助】如何来优化样品分离条件!

浏览0 回复32 电梯直达
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我用LC做样品,
流动相:乙晴:水=95:5
色谱柱:ODS 150mm*4.6
流速:1ml/min
检测器:紫外
溶剂:三氯甲烷
图谱如下:


但从分离上来看,好像结果不是太好!
而且我主要想知道这个样品的副产3.007分出现的峰情况,这个峰前面都是溶剂峰,我如何来优化这个条件。
这个样品在流动相里的溶解性很差!
清晰图



样品相关情况:
它是染料,名称为:溶剂红135
分子式:C18H6Cl4N2O
分子量:408.07
结构如下:

推荐答案:It is me!回复于2008/12/03
两点建议:

1:为什么要用三氯甲烷作为溶剂呢?其它的不行吗?建议更换.

2: 乙腈与水95:5,比例太高.基本上没有多少物质可以保留在柱子上了.所以直接导致溶剂峰和你的样品基本上都是同时出来,样品峰收到严重干扰.
建议降低乙腈比例,增加样品的保留时间.
补充答案:

微澜回复于2008/12/03

建议更换流动相,将其中的乙腈更换为甲醇,原因有二:第一乙腈毒性较高;第二乙腈属低保留性溶剂,并且你用的流动相乙腈占大部分;再就是更换样品的溶解溶剂。

jinseng_zh回复于2008/12/03

可以参考有文献报道的你想检测的那个成分或与它结构相似的化合物的其他分离条件啊。
梯度洗脱试过吗?

xy200609回复于2008/12/03



这个当然没有一致性,我们所用的柱子是一样的,但流动相不一样。这样的情况对分离及相应的峰面积有很大影响吗?

柱子一样,流动相和样品溶剂能与对方一致很困难吗?
有些很难溶的样品在分析条件的摸索上确有一定困难。

Tinacrysta回复于2008/12/03

两个建议;
换250cm柱子试试
减小供试品浓度,因为主峰拖尾,而且主峰峰面积已经是7位数了吧,我没看错的话

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乙腈的比例是不是太高了,先用三氯甲烷溶样,再用流动相稀释
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两点建议:

1:为什么要用三氯甲烷作为溶剂呢?其它的不行吗?建议更换.

2: 乙腈与水95:5,比例太高.基本上没有多少物质可以保留在柱子上了.所以直接导致溶剂峰和你的样品基本上都是同时出来,样品峰收到严重干扰.
建议降低乙腈比例,增加样品的保留时间.
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原文由 nnsss 发表:
乙腈的比例是不是太高了,先用三氯甲烷溶样,再用流动相稀释


我也试过用三氯甲烷溶样,再用流动相稀释,但在稀释后,样品显的很浑浊,怎么办???
我用时也觉的乙晴的比例过高了,是老外们给我的条件,分离出的效果与他们给出的图谱结果不一样,且副产(指3.007)我用此条件所测结果都差不多,但老外们却说有的样品在0.5%,也有达到10%的,可我测出却都在1%左右。我也不断调整波长,可结果都无法改变!!!!
微澜
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建议更换流动相,将其中的乙腈更换为甲醇,原因有二:第一乙腈毒性较高;第二乙腈属低保留性溶剂,并且你用的流动相乙腈占大部分;再就是更换样品的溶解溶剂。
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原文由 wang0996 发表:
原文由 nnsss 发表:
乙腈的比例是不是太高了,先用三氯甲烷溶样,再用流动相稀释


我也试过用三氯甲烷溶样,再用流动相稀释,但在稀释后,样品显的很浑浊,怎么办???
我用时也觉的乙晴的比例过高了,是老外们给我的条件,分离出的效果与他们给出的图谱结果不一样,且副产(指3.007)我用此条件所测结果都差不多,但老外们却说有的样品在0.5%,也有达到10%的,可我测出却都在1%左右。我也不断调整波长,可结果都无法改变!!!!



色谱条件要么追求完全一致,要么就优化出图最好就可以了,换句话说,对方用的柱子和你是一个品牌吗,流动相是一个品牌吗,等等
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原文由 5915860 发表:
建议更换流动相,将其中的乙腈更换为甲醇,原因有二:第一乙腈毒性较高;第二乙腈属低保留性溶剂,并且你用的流动相乙腈占大部分;再就是更换样品的溶解溶剂。


我也同样试过,但此样品在甲醇中没有相应的峰,且对相的溶解度更低!溶剂也换过如:四氢呋喃、二氧六环、DMF等,都达不到很好的效果。。。。。。。
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色谱条件要么追求完全一致,要么就优化出图最好就可以了,换句话说,对方用的柱子和你是一个品牌吗,流动相是一个品牌吗,等等

这个当然没有一致性,我们所用的柱子是一样的,但流动相不一样。这样的情况对分离及相应的峰面积有很大影响吗?
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可以参考有文献报道的你想检测的那个成分或与它结构相似的化合物的其他分离条件啊。
梯度洗脱试过吗?
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xy200609
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原文由 wang0996 发表:


色谱条件要么追求完全一致,要么就优化出图最好就可以了,换句话说,对方用的柱子和你是一个品牌吗,流动相是一个品牌吗,等等


这个当然没有一致性,我们所用的柱子是一样的,但流动相不一样。这样的情况对分离及相应的峰面积有很大影响吗?

柱子一样,流动相和样品溶剂能与对方一致很困难吗?
有些很难溶的样品在分析条件的摸索上确有一定困难。
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