紫外可见分光光度计(UV)

主题:【原创】分光光度计显示的障眼法,你发现了吗???

浏览0 回复30 电梯直达
初学者&九点虎
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这几天做了几个样品,发现一个奇怪的问题,请看:
  做完标准曲线后去测定样品,显示如下:
  吸光度  浓度
  0.048    6.452
  0.048    6.483
  0.026    3.518
  0.026    3.561
  理论上来说,对于一定的标准曲线,斜率和截距是一定的,那样品中如果吸光度相同,那浓度也应该相同啊。
  但测定的时候发现,对于同一吸光度,同一标准曲线,却显示不同的浓度。
百思不得其解。
  想了好久,个人觉得是仪器其实能读到0.0001个吸光度,而只显示出0.001个吸光度,除了这个,还真没想明白。
听听大家的看法!!!
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东方王
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阿du
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显示的位数少了(四舍五入),但实际测定计算的数值位数要多一位,所以显示吸光度相同但计算出的浓度不同。
chenyg_cyg
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0.001应该是显示的最小分辨率,不是稳定可靠的实际分辨率。显示为0.048,也许在仪器内部真正的数据不是0.048。另外早期的分光光度计吸光度显示值为0.1以下时误差是非常大的,最有效的是0.1到0.8之间。现在虽然仪器先进,但是也只是自动化程度更加高,操作方便,光学内部改进的地方还是很少,毕竟还是要降低成本。
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原文由 chenyg_cyg 发表:
0.001应该是显示的最小分辨率,不是稳定可靠的实际分辨率。显示为0.048,也许在仪器内部真正的数据不是0.048。另外早期的分光光度计吸光度显示值为0.1以下时误差是非常大的,最有效的是0.1到0.8之间。现在虽然仪器先进,但是也只是自动化程度更加高,操作方便,光学内部改进的地方还是很少,毕竟还是要降低成本。

现在有仪器能显示0.0001
活到九十 学到一百
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显示的数值是经过修约的,虽然显示的相同,但实际是有差别的,而计算时正是以实际数值来计算的。
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原文由 wangboxzzjs 发表:
显示的数值是经过修约的,虽然显示的相同,但实际是有差别的,而计算时正是以实际数值来计算的。

看来和我想的一样,修约了
夕阳
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吸光度的有效读值位数太少了,因此小数点第四位的变化对浓度值的换算的影响是很明显的。
tutm
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原文由 zhouyuhu 发表:
这几天做了几个样品,发现一个奇怪的问题,请看:
  做完标准曲线后去测定样品,显示如下:
  吸光度  浓度
  0.048    6.452
  0.048    6.483
  0.026    3.518
  0.026    3.561
  理论上来说,对于一定的标准曲线,斜率和截距是一定的,那样品中如果吸光度相同,那浓度也应该相同啊。
  但测定的时候发现,对于同一吸光度,同一标准曲线,却显示不同的浓度。
百思不得其解。
  想了好久,个人觉得是仪器其实能读到0.0001个吸光度,而只显示出0.001个吸光度,除了这个,还真没想明白。
听听大家的看法!!!


提出这个问题,说明楼主观察事物非常仔细,很善于思考。
实际上仪器中测到的是检测器接收到的光子数,转换成电流强度、线性放大后再经AD转换,由软件根据测到的光谱强度计算出吸光度结果。测到的电流强度可以看做是连续变化的,一般分光光度仪内检测器测到的电流强度变化范围至少可达10的6次方(A = -3— +3)。为保证运算精度(特别是加减后的精度),数值的运算位数一般都较多。如国外某品牌的仪器,我发现AD转换后的光谱强度数值变量在储存、运算时浮点数的位数达12—14位。而目前一般仪器光源和检测器的短期物理稳定性只能做到A=0.001,多显示几位也没意义。但是,运算时无论有效数字还是小数点后的位数都很多,因此运算中A=0.001后面可能还有好多位,造成楼主发现的问题。所以我认为这就是该现象的原因,楼主的想法是对的!
该帖子作者被版主 zhouyuhu10积分, 2经验,加分理由:分析仔细透彻
liu999999
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原文由 anping 发表:
吸光度的有效读值位数太少了,因此小数点第四位的变化对浓度值的换算的影响是很明显的。

那这么说读到小数点后第四位是有意义的了
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