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主题：【求助】有做过柱后衍生化实验的大虾们,帮帮忙吧.

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wang810611
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发表于：2009/02/05 22:06:23 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
悬赏金额：20积分 状态： 已解决
我现在正在做一个项目,需要采用柱后衍生化的方法,用荧光检测器进行有关物质及含量的分析,可出图总是不稳定,保留时间及峰面积都差挺多,怎么回事啊?我都快急死了,请大家帮帮我吧.介绍一些经验给我.在此谢过了.
推荐答案：ygx回复于2009/02/05
我做过柱后衍生化的，不过是紫外检测器。
柱后衍生化首先要选择一个合适的着色剂，还要有一个合适的反应浓度：既要适当过量，又要保证试样目标物反应完全，还不浪费试剂；另外反应温度要合适；反应所需的pH值环境要适合；衍生液的流速与流动相流速配比要合适，一般两者流速相同。
仪器方面：需要两个高压泵（一个打流动相，一个打衍生液）、一个控温精度高的衍生化反应器（其内部的的反应盘管长度要合适，要确保使反应完全）。试样经色谱柱流出后，在与衍生液柱后混合时，还需要一个能够保证两者混合均匀的混合器（混合三通）。
你说的保留时间和峰面积重现性差别大，究其原因，可能是：1.流动相或衍生液流速不稳；2.进行衍生化反应的温度波动大，不稳；3.柱后混合器质量不高，造成混合不均，引起峰面积变化大；4.选择的衍生剂不合适或浓度不合适。
补充答案：

老多_小多回复于2009/02/06

1楼说的很详细
你的柱后衍生化是买了哪的，流速稳定吗？

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2009/2/5 22:54:59 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我做过柱后衍生化的，不过是紫外检测器。
柱后衍生化首先要选择一个合适的着色剂，还要有一个合适的反应浓度：既要适当过量，又要保证试样目标物反应完全，还不浪费试剂；另外反应温度要合适；反应所需的pH值环境要适合；衍生液的流速与流动相流速配比要合适，一般两者流速相同。
仪器方面：需要两个高压泵（一个打流动相，一个打衍生液）、一个控温精度高的衍生化反应器（其内部的的反应盘管长度要合适，要确保使反应完全）。试样经色谱柱流出后，在与衍生液柱后混合时，还需要一个能够保证两者混合均匀的混合器（混合三通）。
你说的保留时间和峰面积重现性差别大，究其原因，可能是：1.流动相或衍生液流速不稳；2.进行衍生化反应的温度波动大，不稳；3.柱后混合器质量不高，造成混合不均，引起峰面积变化大；4.选择的衍生剂不合适或浓度不合适。
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老多_小多
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2009/2/6 8:24:42 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1楼说的很详细
你的柱后衍生化是买了哪的，流速稳定吗？
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amwuem
amwuem
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2009/2/6 17:28:05 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你是那的，我司有柱后衍生装置，如需请联系dreamsgood@163.com 13632374563黄生
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