4、食用菌菌种培养基
配方一 马铃薯—蔗糖--琼脂培养基
20%马铃薯煮汁 1000毫升
蔗糖 20克 琼脂 18克
把马铃薯洗净去皮后,切成小块。称取马铃薯小块200克,加水1000毫升,煮沸20分钟后,过滤。在滤汁中补足水分到1000毫升,即成20%马铃薯煮汁。在马铃薯煮汁中加入琼脂和蔗糖,煮沸,使它溶解后,补足水分,分装,灭菌,备用。使用该培养基对pH值要求不严格,可以不测定。
配方二 综合马铃薯培养基
20%马铃薯煮汁 1000毫升
磷酸二氢钾 3克 硫酸镁 1.5克
葡萄糖 20克 维生素 10毫克
琼脂 18克
先配制20%马铃薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各种组分,加热溶解后补足水分,调整pH值到6。分装,灭菌,备用。
该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
(六)染色剂
1、细菌染色剂
配方一 齐氏(Ziehl)石炭酸品红染液
甲液 取石炭酸5克,溶解在95毫升蒸馏水中。
乙液 取0.3克碱性品红,放入研钵中研磨,逐渐加入10毫升95%酒精,继续淹没,使它溶解。
将甲液和乙液混合后,摇匀,过滤,装瓶,备用。
配方二 罗氏(Loeffler’s)美蓝染液
甲液 取5克美蓝,溶于100毫升95%酒精中,制成美蓝—酒精饱和液。
乙液 取氢氧化钾0.01克(或1%氢氧化钾溶液1毫升),溶液也可用于放线菌染色,0.1%浓度可用于酵母菌染色。
配方三 革兰氏(Gram’s)染液
用此液染色因先用甲液染色,再加乙液固定,用丙液处理,最后用丁液复染。四种液体的配方如下:
甲液(结晶紫液)
(1)结晶紫 2克 95%酒精 20毫升
(2)草酸铵 0.8克 蒸馏水 80毫升
使用钱江(1)、(2)
液相混,静置48小时后使用。
乙液(碘液)
碘 1克 碘化钾 2克 蒸馏水 300毫升
将碘化钾溶于少量蒸馏水中,然后加入碘,待碘全部溶解后,加水稀释至300毫升。
丙液 95%酒精溶液
丁液(番红花红液)
2.5%番红花红酒精溶液 10毫升 蒸馏水 100毫升
2、细菌特殊染色剂
配方一 芽孢染液 用此配方染色是用甲液染色后,用乙液复染。
甲液 取5克孔雀绿,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到100毫升,即成孔雀绿染液。
乙液 取番红花红0.5克,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到100毫升,集成番红花红复染液。
配方二 荚膜染液 此配方先用甲液染色,后用乙液复染。
甲液 取结晶紫0.1克,溶于少量蒸馏水后,加水稀释到100毫升,再加入0.25毫升冰醋酸一结晶紫染液。
乙液 取硫酸铜( )31.3克,溶于少量蒸馏水后,加水稀释到100毫升,即成20%硫酸铜脱色剂。
配方三 鞭毛染液
甲液
饱和明矾溶液 2毫升 5%石炭酸溶液 5毫升
20%丹宁酸溶液 2毫升
乙液
碱性品红 11克 95%酒精 100毫升
使用前取甲液9毫升和乙液1毫升相混,过滤即可。
3、植物细胞壁染色剂
配方一 纤维素细胞壁染液(Ⅰ)
取固绿0.1克,溶于100毫升95%酒精中,即成0.1%固绿—酒精溶液。
该液能染色纤维素细胞壁,还用于动植物中作浆质染色剂。
配方二 纤维素细胞壁染液(Ⅱ)
氯化锌 20克 碘化钾 6.5克
碘 1.5克 蒸馏水加至100毫升
先把氯化锌溶于少量蒸馏水中,再加入6.5克碘化钾,在碘完全溶解后,用蒸馏水稀释到100毫升,即成碘—氯化锌溶液。
该染液能把细胞壁染成紫色,胞质染成淡黄色,胞核染成棕色。
配方一 纤维素细胞壁染液(Ⅲ)
甲液 取1克碘和1.5克碘化钾,溶于100毫升蒸馏水中,即成1%碘液。
乙液 取7份硫酸和3份蒸馏水相混,即成66.5%硫酸溶液。
染色时,在材料上滴加甲液,再加一滴乙液,纤维素细胞壁就染成黄色。
配方四 木质化细胞壁染液(Ⅰ)
硫酸化苯胺(或盐酸话本安) 1份
蒸馏水 70份 95%酒精 30份
硫酸 30份
将上述各组分相混,将细胞材料放入混合液里染色,可是木质化细胞壁呈鲜黄或姜黄色。
配方五 木质化细胞壁染液(Ⅱ)
取间苯三酚4~5克,溶于100毫升95%酒精中,即成间苯三酚—酒精液。
先在材料上滴上1滴浓盐酸,然后滴上间苯三酚—酒精液1滴,木质化的细胞壁就染上樱红或紫红色。
配方六 木质化细胞壁染液(Ⅲ)
取1克番红,溶于99毫升蒸馏水中,即成1%番红溶液。