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主题：[咨询]做GPC的朋友，你们都是用什么过滤样品？

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发表于：2005/06/03 11:30:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我用的是一次性的0.45um的滤膜头，插在针管上推，应该是分子量太大的缘故（30-50w），推的时候太费力了，一不小心就穿了！有时捏不紧还会喷出来，很是狼狈！现在又 不知道其他方法，真是苦不堪言，望大家指点！
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2005/6/3 16:28:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们也用0.45微米孔径的过滤器。分子量大概在20晚~50万，因为是国产的，还是比较容易的，一般我们要多次使用后，才废弃。
  做光散射实验时，常采用0.2甚至0.1的膜过滤，通常累得手酸疼，且玻璃针管的头部一不小心就弄断，但过滤速度却非常慢。常想如果能使用真空抽滤装置就好了。
    建议你用国产的膜先滤~
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2005/6/7 15:46:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用力大了你的不容易弄穿吗？
待我换其他滤头试试
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2005/6/13 16:48:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用力过大，导致过滤膜穿透事件至今还没有发生过。
  不知道您做的是什么样品，样品中是否有凝胶，含量多少，30~50万分子量得样品进行GPC测定时，配制浓度应该小于1毫克/毫升吧？我们通常做10-40万的，浓度1毫克/毫升，采用国产过滤膜过滤，从来没出过问题，非常容易，没感觉需要多大力量。你在什么地方，如果近，可以送你一些（当时买的时候特别便宜，好像是天津生产的，不过过滤膜的质量可就难说了）。

  对了，您做GPC用什么做溶剂？
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2005/6/13 16:52:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
当然，如果做顺丁或枝化丁基橡胶，号称10万左右的，就可能堵塞凝胶柱，过滤可麻烦了。但不像你所说的经常穿透过滤膜。
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2005/6/14 18:28:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢楼上的回复
样品是PVDF,我用DMF溶解0.2g到50ml，也就是4mg/ml，一般是在恒温震荡箱摇一晚上，第二天再过滤做样。别人都建议我换另种滤头试试。。
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2005/6/14 18:36:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
PVDF是聚偏氟乙烯
是不是浓度太高了？
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2005/6/14 18:56:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这么高的分子量样品，浓度太大了吧?(是不是进样量很小?分离的情况如何?）我们常使用的样品浓度为1mg/ml．建议你试试降低浓度，过滤一定会容易些的.可以先试一试0.5mg/ml的浓度，与现在所使用浓度的测定结果比较一下（我有点怀疑你的测定结果的正确性啊，会不会偏小啊，峰形很宽吧？）
    另浓度太大也有损GPC柱的．
　　我也不太懂，刚刚涉足此领域，说错了，请更正．
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2005/6/14 19:41:00 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们可以QQ 15496081,交流哈。
分离效果还好，sample loop 是20ul，就是过滤的时候吃力，很讨厌。。
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realfish
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2007/3/27 23:08:00 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
过滤时要注意先要把注射器里的空气排掉再插上滤头，这样能好过滤一些。只是个人经验，你可以试试。
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2007/3/28 10:29:00 13楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做GPC时样品要在溶剂中充分溶解，再进样。对于分子量过高的分子可以降低样品浓度，或者高浓度的样品进行离心分离，取上层进样。

另说明，分子量大的样品对分析柱的影响应该不大，因为标样最大分子量也有500万。
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