土壤农化分析:土壤全磷测定(硫酸一高氯酸消煮法)
土壤全磷测定(硫酸一高氯酸消煮法)
试剂:浓硫酸、高氯酸、二硝基酚(称取0.25g二硝基酚溶于100ml蒸馏水中。)、4mol/L氢氧化钠、2mol/L(1/2)H2SO4(吸取浓硫酸6ml缓缓加入80ml水,边加边搅,冷却后定容到100ml。)、钼锑抗试剂(A.5g/L酒石酸氧锑钾溶液:取酒石酸氧锑钾溶液0.5g溶于100ml水中。B.钼酸铵—硫酸溶液:称取钼酸铵10g,溶于450ml水中,缓慢地加入浓硫酸153ml,边倒边搅。再将A与B混合,最后定容到1L。充分混匀,贮于棕色瓶中。临用前(当天),称取左旋抗坏血酸(C6H8O5,化学纯)1.5g,溶于100mL钼锑混合液中,混匀,此即钼锑抗试剂。有效期24小时,如藏冰箱中则有效期较长。此试剂中H2SO4为5.5mol·L-1(H+),钼酸铵为10 g·L-1,酒石酸氧锑钾为0.5 g·L-1,抗坏血酸为1.5 g·L-1)。磷(P)标准溶液(准确称取45℃烘干4—8小时的分析纯磷酸二氢钾0.2197g于小烧杯中,以少量水溶解,加浓硫酸5ml,将溶液全部洗入1000ml容量瓶中,用水定容至刻度,充分摇匀,此溶液即为含50mg/L的磷基准溶液。吸取50ml此溶液稀释至500ml,即为5mg/L的磷标准溶液,此溶液不能长期保存。)
操作步骤:在分析天平上准确称取通过100目筛(孔径为0.25mm)的土壤样品1g(精确到0.0001)置于50ml开氏瓶中,以少量水湿润,并加入浓H2SO48ml,摇动后(最好放置过夜)再加入70—72%的高氯酸(HClO4)10滴摇匀。于瓶口上放一小漏斗,置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后,继续消煮20分钟,全部消煮时间约为45—60分钟。将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中,冲冼时用水应少量多次。轻轻摇动容量瓶,待完全冷却后,用水定容,用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。同时做空白试验。吸取滤液5ml于50ml容量瓶中,用水稀释至30ml,加二硝基酚指示剂2滴,用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H2SO4)溶液调节pH至溶液刚呈微黄色。加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀,用水定容至刻度。在室温高于15℃的条件下放置30分钟后,在分光光度计上以700nm的波长比色,以空白试验溶液为参比液调零点,读取吸收值,在工作曲线上查出显色液的P—ug/mL数。
标准曲线的绘制:分别吸取5ug/mL标准溶液0,1,2,3,4,5,6ml于50ml容量瓶中,加水稀释至约30ml,加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。即得0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6ug/mL P标准系列溶液,与待测溶液同时比色,读取吸收值。在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标,Pug/mL数为横坐标,绘制成工作曲线。
结果计算:全P ug/Kg=显色液ug/mL×显色液体积×分取倍数×10-3/W
显色液Pug/mL—从工作曲线上查得的Pug/mL;
显色液体积—本操作中为50ml;
分取倍数—消煮溶液定容体积/吸取消煮溶液体积;
10-3—将ug换算成g
W—土样重(g)。