主题:【讨论】GPC柱子范围选择对分子量结果影响有多大?

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benbenzuo
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请问测几万分子量的样品需要多大范围的柱子?如果用上限几百万的柱子来测几万的样品会出现什么样的结果?
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flyaway
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原文由 benbenzuo 发表:
请问测几万分子量的样品需要多大范围的柱子?如果用上限几百万的柱子来测几万的样品会出现什么样的结果?

如果柱子不匹配,肯定做出的分子量结果不准。
nitudi
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1.如果选择的柱子范围不对,你想要分离分子量比较接近的两个不同分子量分布时,组分的分离度就不高;如果你要分析的仅仅是一个峰的物质,那影响不大,充其量也就是峰型不太好看。不知道你用的是哪个厂家的仪器和柱子,可以参考柱子包装盒带过来的说明书,里面一般有介绍怎么选择柱子,哪个柱子会比较合适之类的信息。
2 分子量测得准不准我认为和做的曲线和泵的稳定性有关。
benbenzuo
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原文由 nitudi 发表:
1.如果选择的柱子范围不对,你想要分离分子量比较接近的两个不同分子量分布时,组分的分离度就不高;如果你要分析的仅仅是一个峰的物质,那影响不大,充其量也就是峰型不太好看。不知道你用的是哪个厂家的仪器和柱子,可以参考柱子包装盒带过来的说明书,里面一般有介绍怎么选择柱子,哪个柱子会比较合适之类的信息。
2 分子量测得准不准我认为和做的曲线和泵的稳定性有关。


我就是测一个峰的物质,不要求分离度,只想把分子量及其分布测准确
我们的机器是PL公司的高温GPC,采用DMF做流动相,柱温60度,选用柱子范围一根是200-200万,一根是200-40万,两根连接,测分子量几万的样品,总是测成几十万,现在怀疑是柱子选的不正确,另外还有标样分子量范围可能也过大,都对几百万,不知标样分子量对结果有没有影响,请指教!
sycamore0811
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nitudi
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测单一组分理论上用一个柱子就可以,要选择合适范围的柱子,色谱柱标注都是能测几千到几百万的,说明书一般会标出最佳的测定范围,也就是选择被测分子量在曲线比较平坦的地方出现的柱子,如果你要测的组分在曲线的两头比较陡峭的部位,这个柱子的测定误差会比较大,精密度应该也不高。标样也选择和你要测的样品分子量接近的,这样才能提高你的准确度,单一组分用一个柱子分析速度快很多。
ysh_feng
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原文由 benbenzuo 发表:
原文由 nitudi 发表:
1.如果选择的柱子范围不对,你想要分离分子量比较接近的两个不同分子量分布时,组分的分离度就不高;如果你要分析的仅仅是一个峰的物质,那影响不大,充其量也就是峰型不太好看。不知道你用的是哪个厂家的仪器和柱子,可以参考柱子包装盒带过来的说明书,里面一般有介绍怎么选择柱子,哪个柱子会比较合适之类的信息。
2 分子量测得准不准我认为和做的曲线和泵的稳定性有关。


我就是测一个峰的物质,不要求分离度,只想把分子量及其分布测准确
我们的机器是PL公司的高温GPC,采用DMF做流动相,柱温60度,选用柱子范围一根是200-200万,一根是200-40万,两根连接,测分子量几万的样品,总是测成几十万,现在怀疑是柱子选的不正确,另外还有标样分子量范围可能也过大,都对几百万,不知标样分子量对结果有没有影响,请指教!
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推荐用2个40-200W的串联,3个更好
小不董
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原文由 benbenzuo 发表:
我就是测一个峰的物质,不要求分离度,只想把分子量及其分布测准确
我们的机器是PL公司的高温GPC,采用DMF做流动相,柱温60度,选用柱子范围一根是200-200万,一根是200-40万,两根连接,测分子量几万的样品,总是测成几十万,现在怀疑是柱子选的不正确,另外还有标样分子量范围可能也过大,都对几百万,不知标样分子量对结果有没有影响,请指教!

最好不要把两根不同的柱子串联来使用,这样得到的曲线不好,既然你知道分子量大概在几万,那就用200-40万的柱子就可以了。
柱子测定的分子量很宽,用来初步测定分子量大小比较好,然后选择适合的分子量大小的柱子来精确分析。
viscotektegent
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原文由 nitudi 发表:
1.如果选择的柱子范围不对,你想要分离分子量比较接近的两个不同分子量分布时,组分的分离度就不高;如果你要分析的仅仅是一个峰的物质,那影响不大,充其量也就是峰型不太好看。不知道你用的是哪个厂家的仪器和柱子,可以参考柱子包装盒带过来的说明书,里面一般有介绍怎么选择柱子,哪个柱子会比较合适之类的信息。
2 分子量测得准不准我认为和做的曲线和泵的稳定性有关。


我就是测一个峰的物质,不要求分离度,只想把分子量及其分布测准确
我们的机器是PL公司的高温GPC,采用DMF做流动相,柱温60度,选用柱子范围一根是200-200万,一根是200-40万,两根连接,测分子量几万的样品,总是测成几十万,现在怀疑是柱子选的不正确,另外还有标样分子量范围可能也过大,都对几百万,不知标样分子量对结果有没有影响,请指教!


对于分子量只有几万的样品,到40万的柱子还可以,而到200万的柱子稍大一些,也凑合。我觉得你的问题可能是标样范围不太合理,没有小分子量的标样,那么误差都比你的分子量大很多了!另外,DMF体系本身就不好做。PL有专用柱子吗?我记得没有吧?DMF体系要加盐的,一般是色谱纯或者光谱纯的溴化锂、氯化锂。因此,如果你的柱子不耐腐蚀,估计够呛啊。一般会出现较长的拖尾峰,那么就说明柱子不行,测试结果当然就不对了。至少分子量分布不对。一般地,我们都推荐用惰性柱做DMF体系的分析。柱子填料表面钝化过,耐腐蚀,寿命长。
tosohsh
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选择GPC的柱子要从以下两个方面考虑:
1.柱子的级别:样品分子量在柱子的线性范围内,不能只考虑最高的排阻界限。每个柱子厂家都有不同规格级别的柱子可供选择。
2.使用的溶剂:常见的GPC柱子都是只能在THF体系下使用的,如果用在DMF、氯仿等特殊体系下,需要使用特殊的柱子。目前有些柱子厂家可提供使用在此类溶剂下的GPC柱子。

GPC柱子的选择
huaxuejia
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1,先看你用什么溶剂,如果用在DMF、氯仿,六氟民丙醇等特殊体系下,需要选择该溶剂的专用柱,最好不要用THF置换的柱子,效果不好。
2,再看分子量范围,根据数均重均分子量大小,柱子的排阻限范围选择色谱柱。
3,选择和样品接近的标准品。
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