快速导航采购仪器提醒

液质联用（LCMS）

版主:

入住本版

专家:

仪器信息网

居民列表

仪器社区 > 质谱 > 液质联用（LCMS）帖子详情

快速回复发表新帖最新帖

主题：【已应助】【求助】有谁在用液质做面包糠,预裹粉等辅料的硝基呋喃代谢物吗?

浏览0 回复21 电梯直达

xiao_ru

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

发表于：2009/02/24 22:24:20 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

称取粉碎后的样品2g（精确到0.05g）待测样品于50mL离心管中，加入5mL0.2mol/L盐酸溶液，和0.15mL2-硝基苯甲醛溶液，旋涡振荡~1min。避光置于37℃恒温水浴振荡器中过夜（约16hr）。
7.3 样品净化
待恢复至室温，加入5mL 4mol/L 磷酸氢二钠溶液，调节pH直至7.0~7.5，加入4mL乙酸乙酯，漩涡振荡~1min，4000r/min离心5~10min，取上层清液转移至10mL玻璃离心管管中；再加入4mL乙酸乙酯，漩涡振荡~1min，4000r/min离心5~10min，取上层清液转移至同一10mL玻璃离心管管中。在氮气氛围下，40℃吹干溶液。精确加入1.0mL甲醇水溶液（甲醇：水=5：95）溶解残留物，过0.45um滤膜，过滤后上机。

拿这个前处理的方法做面包糠,预裹粉等辅料,做到加乙酸乙酯离心后,会形成果冻状,乙酸乙酯层吸不出来?是什么原因呢?怎么解决?

0
赞贴
21
回帖
0
收藏
0
拍砖
版主
招募

为您推荐

近期热榜

热门活动

您可能想找: 液质联用(LC-MS) 询底价

选参数看心得找厂商查方案

专属顾问快速对接

立即提交

相关阅读

zhufangwei

禁止发帖修改昵称

ID：zhufangwei

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2009/2/25 13:08:11 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

水相和有机相乳化严重，可以调整一下水相，感觉你水相太复杂了

赞贴

拍砖

xuyu100

禁止发帖修改昵称

ID：xuyu100

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2009/3/16 9:41:52 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

加入一定量的硅藻土如1G，试试看，应该很好

赞贴

拍砖

dickwang2008

禁止发帖修改昵称

ID：dickwang2008

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2009/3/16 11:03:33 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 xiao_ru 发表:
称取粉碎后的样品2g（精确到0.05g）待测样品于50mL离心管中，加入5mL0.2mol/L盐酸溶液，和0.15mL2-硝基苯甲醛溶液，旋涡振荡~1min。避光置于37℃恒温水浴振荡器中过夜（约16hr）。
7.3 样品净化
待恢复至室温，加入5mL 4mol/L 磷酸氢二钠溶液，调节pH直至7.0~7.5，加入4mL乙酸乙酯，漩涡振荡~1min，4000r/min离心5~10min，取上层清液转移至10mL玻璃离心管管中；再加入4mL乙酸乙酯，漩涡振荡~1min，4000r/min离心5~10min，取上层清液转移至同一10mL玻璃离心管管中。在氮气氛围下，40℃吹干溶液。精确加入1.0mL甲醇水溶液（甲醇：水=5：95）溶解残留物，过0.45um滤膜，过滤后上机。

拿这个前处理的方法做面包糠,预裹粉等辅料,做到加乙酸乙酯离心后,会形成果冻状,乙酸乙酯层吸不出来?是什么原因呢?怎么解决?

我以前遇到过这种现象，可以在提取试剂中加入少量的异丙醇，然后离心时增加转速；如果还有此现象，那么就加入少量的盐

赞贴

拍砖

noon

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2009/5/12 22:01:15 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

待恢复至室温，加入5mL 4mol/L 磷酸氢二钠溶液，调节pH直至7.0~7.5，

这一步你先离心，取出液体再加乙酸乙酯试试。

赞贴

拍砖

ren0478

禁止发帖修改昵称

ID：ren0478

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2009/6/26 12:21:07 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 xiao_ru 发表:
称取粉碎后的样品2g（精确到0.05g）待测样品于50mL离心管中，加入5mL0.2mol/L盐酸溶液，和0.15mL2-硝基苯甲醛溶液，旋涡振荡~1min。避光置于37℃恒温水浴振荡器中过夜（约16hr）。
7.3 样品净化
待恢复至室温，加入5mL 4mol/L 磷酸氢二钠溶液，调节pH直至7.0~7.5，加入4mL乙酸乙酯，漩涡振荡~1min，4000r/min离心5~10min，取上层清液转移至10mL玻璃离心管管中；再加入4mL乙酸乙酯，漩涡振荡~1min，4000r/min离心5~10min，取上层清液转移至同一10mL玻璃离心管管中。在氮气氛围下，40℃吹干溶液。精确加入1.0mL甲醇水溶液（甲醇：水=5：95）溶解残留物，过0.45um滤膜，过滤后上机。

拿这个前处理的方法做面包糠,预裹粉等辅料,做到加乙酸乙酯离心后,会形成果冻状,乙酸乙酯层吸不出来?是什么原因呢?怎么解决?

做面粉会经常遇到的乳化现象啊，我以前也做过。这里面还有像鸡蛋、油脂等基质很复杂提取时很难的样品，对待这样的样品首先要知道是什么原因引起的，面粉的这类样品解决方案很简单，就是提高提取剂的量，一般最低是10ml提取，然后再像里面添加氯化钠和乙腈少许（以可以沉淀蛋白为止）。因为引起面粉类样品乳化的主要原因就是面粉中的蛋白问题。加氯化钠的目的主要是增大水相的极性利于乙腈的分离。在选择离心的时候最好是能在7000转/min以上。关于呋喃方面的检测我个人最近也在整理总结。这次就先说这些了

该帖子作者被版主 zhufangwei加 3积分， 2经验，加分理由：说的有理有据的，这种为什么、是什么的方式很好

赞贴

拍砖

zhufangwei

禁止发帖修改昵称

ID：zhufangwei

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2009/6/27 16:46:02 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

不知道楼主问题解决没有呢，提高水相的用量，加大离心的速度，理论上推测是可以获得较好的效果的，乳化或者这种没有分层的现象说明了水相中的易溶于有机相的成分与有机试剂互溶了，导致三者混成一块而无分层。

赞贴

拍砖

贝壳里的海

禁止发帖修改昵称

ID：oucwzf

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2009/7/8 18:28:21 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

比较同意4楼的想法，我08年以前也是这样做的。“至室温，加入5mL 4mol/L 磷酸氢二钠溶液，调节pH直至7.0~7.5”然后离心，取出磷酸氢二钠溶液，再加入4mL乙酸乙酯......，我当时是用ELISA做的，前处理方法都是差不多的，不过没有做回收率验证，不知道方法的具体可行性。当时经常分析鸡蛋蛋白粉，什么的，经常检出，不知道是不是干扰严重引起的假阳性。

赞贴

拍砖