紫外可见分光光度计(UV)

主题:【线上讲座之九】:分光光度计的发展及光源系统(本期活动已经结束,敬请关注下期)

浏览0 回复234 电梯直达
祥子
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原文由 walkman 发表:
我们在选择光度计时经常遇到带宽 bandwidth,例如20nm, 10nm, 2nm,1nm, 请问我们作为用户如何判断带宽是准确的? 20nm 和2nm的可以通过数值的精确度看出区别,但是2nm 和 1.8nm 就很难看出来了? 纳米是很小的,厂家又是任何保证带宽的呢? 谢谢!


您好。

李昌厚老师的书上说,国际上对光谱带宽的测试方法一般是采用“谱线轮廓法”。就是用某些光源的特征谱线,对它进行光谱扫描,绘出该谱线的轮廓,在测出该谱线的半峰宽即为光谱带宽。

对于客户,我觉得,假如判断光谱带宽是否是1nm,可以对一个物质的相距1nm的两个吸收峰进行光谱扫描,看能不能分辨出来,或者,可以测试一个吸收峰半宽度为1nm的样品,看峰型怎么样,也可以粗略的判断下。

厂家一般用Hg灯,使用546.1nm和253.7nm等特征线进行光谱测量。

光谱带宽依据的公式是

SBW  = [ ( d x cos(φ)) / ( m x f ) ] x b

所以,可以减小光栅常数d,改用更高的光谱级数m,增大焦距f或者减小狭缝间距b.

对于固定的仪器d,m,f一般是固定了,所以一般都是改变b来实现的。

现在有些仪器的狭缝可以做到5um。

所以为了保证光谱带宽,必须有优良的光学设计水平和精密机械加工工艺。

现在的很多微型分光光度计采用了MEMS(微电子机械系统)技术,如下是日本浜松公司的一个利用MEMS技术制作的光栅



对于狭缝,在前面的帖子有回复,您可以看看,在69楼。


祥子
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tutm
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原文由 wang82yanhong 发表:
尊敬的nemoium(nemoium)先生您好,我是仪器信息网会员wang82yanhong,对于紫外分光很感兴趣,我们实验室现在用的使PE Lambda 850 UV/VIS Spectormeter,请您介绍一下这仪器的各方面知识和现在最通用的报告模版形式?谢谢

检测报告形式一般是按应用检测项目而定的,比如按某一个国标方法检测食品中某一成分含量,报告模板应按照标准中的指定项来写,有些内容复杂的标准中会有报告模板的。
对于具体的一台仪器所做的测试,报告一般包括测试时的仪器名称、型号,时间,测量模式,样品名称、来源,样品性状,委托人,测试内容(方法),结果(分光光度法可能要附标准曲线),测试人员等。
祥子
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原文由 doxw0323 发表:
光度计,最核心的部位应该在哪里?
使用时,需要维护和保护的部位是哪里?
有人说是保持干燥。还应该注意什么呢?


您好。

我觉得最核心的部分是单色器了。一般是一个黑匣子。

需要维护和保护的就是灯室了。一般这里是允许用户操作的。

还有就是减少灰尘、远离腐蚀性气体,没必要不要经常搬动仪器。

仪器如果如果长时间不用,要用罩子盖住,并定期开机,预热上一下。
祥子
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原文由 wangjoe 发表:
你好!
看完后,对分光光度计有了一个新的认识,希望同类的讲座在线培训会越来越多!让大家更好的了解仪器,但是现在市场上光光度计的生产厂家越来越多,不知道谁家的相对好些(进口,国产)谢谢!


说实话,国产的,我是最钦佩北京普析通用的技术了。

因为我最开始学习的时候,看的是李昌厚老师的书,书上对普析的产品有较多的举例,普析的产品许多技术指标都非常高。李老师是普析的顾问,也不无关系。

后来在有些文献上也听过江苏的天瑞,觉得技术实力也很强。

所以,我觉得是天瑞和普析通用很强。

国内其他的厂家,感觉体制还未完全转型。

国外的仪器,像varian 和PE的都很强。

这些主要是看报道的,也不乏有枪手。






tutm
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原文由 walkman 发表:
我们在选择光度计时经常遇到带宽 bandwidth,例如20nm, 10nm, 2nm,1nm, 请问我们作为用户如何判断带宽是准确的? 20nm 和2nm的可以通过数值的精确度看出区别,但是2nm 和 1.8nm 就很难看出来了? 纳米是很小的,厂家又是任何保证带宽的呢? 谢谢!

带宽校验,国际上通行的做法是用氘灯656.1nm特征谱线的半高宽度(nm)来测量的。在实际使用的不同波长下,这个带宽可能不尽相同,但是通行的检验方法就是这样的。可参考:
:【讨论】紫外安装验收现场都测了哪些指标?
http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20090218/1743107/
:【讨论】各波长下单色光的纯度是一样的吗?
http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20090212/1733551/
追风男儿
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原文由 nemoium 发表:
原文由 llxwzy 发表:
尊敬的nemoium(nemoium)先生您好,我是仪器信息网会员llxwzy,我们使用的是上海精密7230G,我一直有个疑问:开机预热时,是打开比色皿盖预热好呢,还是盖上好呢?


您好,开机后,打开样品室盖预热最好了。我以前遇到过一个仪器由于预热未打开样品室盖,造成读数一直不稳定。而且由于像光电管、光电倍增管在光的长时间照射下会有疲劳效应,灵敏度会降低。


你好nemoium(nemoium)先生
我们用的是北京生产的T6紫外分光光度计,用的时候都是关盖预热
这样测出来的数据才能稳定,不知道这是为什么???
在就测量是开着盖,零点来回跳动很大
关着盖测量,零点就比较稳定,不知这有为什么???
谢谢
tutm
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原文由 mka 发表:
原文由 nemoium 发表:
原文由 mka 发表:
尊敬的nemoium(nemoium)先生您好,我是仪器信息网会员,对于分光很感兴趣,
请问:在用棱镜分光光度计和光栅分光光度计在同一波长条件下测量同一溶液,为什么吸光度会有较大差别(浓度不同,差别不同)?什么原因请详细说明,我洗耳恭听。



您好,非常感谢您的参与。

这个可能是光谱纯度问题。

比如,我们检查仪器波长是否准确时,一般是先看看580nm的光是否是黄色的光,不过这点是针对光栅分光光度计的,对于棱镜的,您看580nm的光,绝对不可能是黄色的,一般是橘黄色,还略带点红,所以,棱镜的光谱纯度不行。另外,棱镜色散的光谱谱线排列不均匀,不同波长处,谱线的疏密不同,像光栅色散光谱是匀排光谱,各个波长处的谱线间距基本一致,这样,谱线的纯度要高很多。


不好意思,现在我正在分析改进的方法。我所表达的意思是例如721与722在波长及光源性能(包括杂散光)都可以保障的情况下,测得的吸光度不同,光谱纯度肯定不一样,但在所测溶液对波长不太敏感的情况下(意思是钝峰),这里是否与狭缝)入射的光通量)有关?或许还有什么其他的原因?

分光光度计仪器之间的测试结果差异,主要来自仪器之间杂散光和带宽(光谱纯度)不同。不同仪器不同波长下的这两参数的实际值可能是不一样的。其它还有光斑大小,比色皿架高度等也都可能造成差异。
72型系列分光光度计,除了使用标准溶液检定(如重铬酸钾)在指定波长下吸光度必须一致以外,同一厂家的同一型号之间,各种波长下的吸光度有时都难以比较,更别说不同型号、不同类别光学元件的仪器相互比较了。
吖唲呦
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原文由 zcp1130 发表:
你好nemoium(nemoium)先生
我们用的是北京生产的T6紫外分光光度计,用的时候都是关盖预热
这样测出来的数据才能稳定,不知道这是为什么???
在就测量是开着盖,零点来回跳动很大
关着盖测量,零点就比较稳定,不知这有为什么???
谢谢


您好,主要是预热时由于不进行测量,所以希望光电检测器不要受光的照射。

T6没见过,刚刚看了下T6新世纪的说明书,也没见提预热。

T6的样品室,打开样品室盖子时,您能不能感觉到在样品室内有个光门的合闭呢?
图1是T6的图,从中没看到控制光门的机构,有些机子会有一个顶杆,当盖住盖子时,顶杆动作,光门打开。

图1

您知道图1中的那些槽位是做什么的吗?


图2是一个常用的样品室内的光门的控制机构

图2

不同的仪器设计不同。


打开样品室盖,零点跳动,可能是受环境光的影响。
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