原文由 hxl0832 发表:
大家好,我用waters HPLC,氨基柱,蒸发光检测器测定单糖时,出现了一些问题,想问问有没有前辈可以给予指导,不生感激。
1.似乎听说蒸发光检测器基线都不是很平吧,我不过流动相的时候,基线还不错的,都在0.05以内LSU,通上流动相(乙腈和水:80/20)后,基线基本在2LSU了。工程师说即使这样的话,如果样品含量高,这样的基线也可以填平了,说蒸发光检测器一般检测含量大于100LSU的。然而我的标样跑出峰的时候因为浓度低,80左右,基线为2的话,基本很难看,峰是信号梯度上升下降形成的,很晕啊。我该怎么办。
2.其次,想问问有没有好的分离单糖的条件啊,我用的条件分不开啊
氨基柱:150×4.5mm,柱温25,漂移管温度50(工程师说我们的2424检测器不能设太高),流动相乙腈和水:80/20,流速:1.0ml/min,氮气流速2.3,峰一般在15分钟以内就出完了。
谢谢啊,大家帮我出出主意吧
1 因为ELSD是通用型检测器,流动相中微量杂质可能都会导致基线波动。对于你的问题,既然所测样品浓度低,那就加大取样量,浓缩样品;
2 你的条件分不开,可能有几方面原因:一是柱子,可以换成长柱,或者有一种专门做糖的柱,问问仪器公司就可以买到。二是流动相,可以换换有机相,或者换成多有机相的混合溶剂;三是流速,可以适当降低流速。还有一种方法是不用
液相了,改用
气相色谱法,具体操作不是一两句能讲清楚,可以查阅相关文献