主题:【哺育新手活动】色谱柱的使用和维护

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greedybird
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fengxuemei
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“对于非极性柱,比如C8和C18,由于纯水不能浸润填料表面而冲倒碳链,造成柱效下降。另外,分析样品时由于纯水不能浸润填料表面形成水膜,出现样品不保留而使分离度下降,重复性差,所以对于一般的C8和C18柱,有机溶剂的比例不应低于5%。”

现在也有一些100%水性柱啊,可以用纯水冲柱子的。
calchas
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原文由 fengxuemei 发表:
“对于非极性柱,比如C8和C18,由于纯水不能浸润填料表面而冲倒碳链,造成柱效下降。另外,分析样品时由于纯水不能浸润填料表面形成水膜,出现样品不保留而使分离度下降,重复性差,所以对于一般的C8和C18柱,有机溶剂的比例不应低于5%。”

现在也有一些100%水性柱啊,可以用纯水冲柱子的。


现在号称能用100%水流动相的,只是减少了柱效下降的影响,而不是完全避免。
如果是对现在的液相柱价格感觉很便宜,随时可以更换的,用纯水吧。但如果是对价格很敏感,一根柱子要用很久的,建议不要用95%以上的水冲洗。
shengwujian30
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原文由 calchas 发表:
原文由 fengxuemei 发表:
“对于非极性柱,比如C8和C18,由于纯水不能浸润填料表面而冲倒碳链,造成柱效下降。另外,分析样品时由于纯水不能浸润填料表面形成水膜,出现样品不保留而使分离度下降,重复性差,所以对于一般的C8和C18柱,有机溶剂的比例不应低于5%。”

现在也有一些100%水性柱啊,可以用纯水冲柱子的。


现在号称能用100%水流动相的,只是减少了柱效下降的影响,而不是完全避免。
如果是对现在的液相柱价格感觉很便宜,随时可以更换的,用纯水吧。但如果是对价格很敏感,一根柱子要用很久的,建议不要用95%以上的水冲洗。

刚做液相的时候,师姐就强调,不能用纯水洗柱子,至少有百分之五的有机相,我现在都是这么用的。
cherry_sun
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请问楼主,做完样品分析后一般怎么冲洗柱子,冲洗多久啊。我一般是只用纯有机相冲洗15min,慢慢减流速到0后就关机了。看过楼上诸位说的,是不是还要用大水相得流动相冲洗1h左右,以免有亲水性的样品挂在柱子上?
喜羊羊
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这些其实都是一些理论知识,我曾经尝试过用这些方法来再生色谱柱但效果都甚微,清洗柱头筛板或直接换柱头填料倒是一个不错的选择
li_min19831982
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原文由 fengxuemei 发表:
请教一下:如果不小心用水冲洗了柱子,且让水在柱子里保留过夜,会不会对柱子造成不好的影响啊?

当然不好了,但是以后不能这样做了,既然知道了正确的方法
辣椒王
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原文由 cherry_sun 发表:
请问楼主,做完样品分析后一般怎么冲洗柱子,冲洗多久啊。我一般是只用纯有机相冲洗15min,慢慢减流速到0后就关机了。看过楼上诸位说的,是不是还要用大水相得流动相冲洗1h左右,以免有亲水性的样品挂在柱子上?


具体怎么清洗还是取决于你的样品分离所使用的溶剂,
如果是比较干净的样品,流动相是比如甲醇水或者乙腈水,直接用流动相多冲洗半个小时就可以了。
如果是使用了缓冲盐的,最好先用比较大的水相冲洗,梯度降低到大比例的有机相,最后用纯的有机溶剂再生效果比较好。我做三聚氰胺就是这么做的。

当然,这里说的都是反相柱,正相柱另有方法。
zhengmingguo
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支持楼上的  我做三聚氰胺的时候做完了就是先用乙腈和水10:90的比例冲洗20分钟  然后乙腈和水50:50的比例冲洗20分钟  最后用乙腈冲洗20分钟  谈后关机,个人感觉还比较好,柱效下降的不是很厉害
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