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液相色谱（LC）
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主题：【求助】做实验时遇到的困难，望高手指点

浏览0 回复8 电梯直达
liuhajie
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发表于：2009/04/11 16:40:49 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我刚开始做实验，遇到了一些困难，希望有牛人指点。
    为什么对一个化合物进行液相色谱分析时应该查该化合物的分子量，分子式，PKa值，UV光谱图，化合物在样品中的浓度范围，样品的溶解度。
    谢谢
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2009/4/11 16:46:39 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 liuhajie 发表:
我刚开始做实验，遇到了一些困难，希望有牛人指点。
    为什么对一个化合物进行液相色谱分析时应该查该化合物的分子量，分子式，PKa值，UV光谱图，化合物在样品中的浓度范围，样品的溶解度。
    谢谢

分子量和分子式可以简单判断一下物质的极性大小，大致的保留行为，pKa可以指导流动相的pH值，很多物质的分离都受到流动相pH值的影响，UV谱图找该物质的最大吸收，灵敏度高。个人观点
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知足常乐！
wenshaowei-2008
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2009/4/11 19:08:01 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 lpr20 发表:
原文由 liuhajie 发表:
我刚开始做实验，遇到了一些困难，希望有牛人指点。
    为什么对一个化合物进行液相色谱分析时应该查该化合物的分子量，分子式，PKa值，UV光谱图，化合物在样品中的浓度范围，样品的溶解度。
    谢谢

分子量和分子式可以简单判断一下物质的极性大小，大致的保留行为，pKa可以指导流动相的pH值，很多物质的分离都受到流动相pH值的影响，UV谱图找该物质的最大吸收，灵敏度高。个人观点

精辟！！！

未知化合物液相色谱分析无非就三方面：色谱柱的选择，流动相的选择，检测波长的确定
通过对化合物以上物理性质的了解，大致就可以确定检测方法了
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有水有渝
xky0230699
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2009/4/12 4:58:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个建议先找一下方法开发方面的书看看，里面很详细的说明了这些参数的意义。
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flame_2007
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2009/4/12 10:37:02 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 liuhajie 发表:
我刚开始做实验，遇到了一些困难，希望有牛人指点。
    为什么对一个化合物进行液相色谱分析时应该查该化合物的分子量，分子式，PKa值，UV光谱图，化合物在样品中的浓度范围，样品的溶解度。
    谢谢


化合物在样品中的浓度范围是让你根据检测范围来确定你要用什么样的检测器（也就是灵敏度），通常紫外是最常用（这就是为什么要UV光谱图），但是紫外的灵敏度只有微克级别，如果到了ng或pg，那就肯定考虑检测器。
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feishawuhui
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2009/4/12 10:55:49 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最好先了解一下溶解度，选择合适的溶剂溶解，最好用接近流动相的溶剂配成合适的浓度（一般液相可接受的浓度为几十微克每毫升）。再就是要了解样品的极性，好选择合适的流动相，要了解极性当然要用到结构式了。知道了紫外光谱图可以选择检测波长，一般在200-400nm选择样品的最大吸收波长为检测波长。
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老多_小多
emoc98311
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2009/4/12 14:41:41 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
分子量，分子式，PKa值，UV光谱图，化合物在样品中的浓度范围，样品的溶解度
如果一个组分还没有方法，要建立HPLC方法就要考虑这几个因素
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〓猪哥哥〓
03yx2
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2009/4/13 7:58:04 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 lpr20 发表:
原文由 liuhajie 发表:
我刚开始做实验，遇到了一些困难，希望有牛人指点。
    为什么对一个化合物进行液相色谱分析时应该查该化合物的分子量，分子式，PKa值，UV光谱图，化合物在样品中的浓度范围，样品的溶解度。
    谢谢

分子量和分子式可以简单判断一下物质的极性大小，大致的保留行为，pKa可以指导流动相的pH值，很多物质的分离都受到流动相pH值的影响，UV谱图找该物质的最大吸收，灵敏度高。个人观点


不错，化合物在样品中的浓度范围，主要确定其响应值的大小，样品的溶解度好可以准确计算出真实的含量。
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毛毛虫
acic_zyf
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2009/4/13 15:44:03 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这样可以根据样品的一些物化性质正确的找到适合检测样品的方法
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