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主题：【求助】MnP酶活测定及计算方法求助

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hc1027
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发表于：2009/04/11 17:39:52 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
该帖子已被zhouyuhu设置为精华；
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我是做关于酶解木质素方面的。实验中要测定MnP（锰过氧化物酶）的酶活。
我是用紫外光度法中的动力学测MnP的酶活，
（测定方法： 先将0.2113g MnSO4 溶解于1 L 酒石酸缓冲液( 50mmol·L - 1 ,pH = 4.5) 中,再取2.4 mL 的该溶液和0.6mL 粗酶液混匀,即得3 mL 反应液. 在30 ℃下,往此反应液中加80μL H2O2 溶液(20 mmol·L - 1 ) 启动酶促反应,并在290 nm 波长下测定反应2 min 前后的反应液吸光度变化. 一个酶活力单位(U) 定义为每分钟氧化Mn2 + 产生1μmol Mn3 + 所需的酶量.）

问题是我得到了吸光度随时间（2min）的变化曲线后，如何对它进行处理？应该取那些数据进行计算？如何得到要求的酶活？能帮小弟找一些这方面的资料吗？不胜感激。
我无法上传变化曲线，所以大致手绘下：

推荐答案：石英晶体微天平回复于2009/04/13
可以用QCM试试，把木质素固定在镀金的石英传感片上，当发生水解反应时传感器的频率会逐渐升高。
补充答案：

dong3626回复于2009/04/11

感觉是缺少一个吸光值和浓度之间的关系式。
我记得以前做的时候有个关系式的。。。现在给忘了。。

你可以查找下这个测定的 具体方法。很多文献都是很简单的描述。

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2009/4/11 18:15:29 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感觉是缺少一个吸光值和浓度之间的关系式。
我记得以前做的时候有个关系式的。。。现在给忘了。。

你可以查找下这个测定的 具体方法。很多文献都是很简单的描述。
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hc1027
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2009/4/11 18:53:48 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 dong3626 发表:
感觉是缺少一个吸光值和浓度之间的关系式。
我记得以前做的时候有个关系式的。。。现在给忘了。。

你可以查找下这个测定的 具体方法。很多文献都是很简单的描述。


找了些文献，但都没有说如何计算的，更没有关于这种曲线的分析之类的，都是直接将酶活的数字给出来了。

请问还有没有高人能指点指点？
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石英晶体微天平
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2009/4/13 16:03:04 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以用QCM试试，把木质素固定在镀金的石英传感片上，当发生水解反应时传感器的频率会逐渐升高。
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