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紫外可见分光光度计（UV）
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主题：【求助】双波长光度计是怎么工作的？

浏览0 回复23 电梯直达
524990103
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发表于：2011/11/16 23:31:55 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在最大波长处吸光度的误差最小，那双波长光度计怎么保证它的准确性？
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2011/11/16 23:48:35 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没有用过双波长仪器，有没有使用的，上来讲讲吧
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xiaowang268
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2011/11/17 9:34:27 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在这两个波长处，干扰组分的吸光度相等，通过差减法，可消除干扰。
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夕阳
anping
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2011/11/17 13:16:13 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 524990103(524990103) 发表:
在最大波长处吸光度的误差最小，那双波长光度计怎么保证它的准确性？


楼主的问题有些交代的不是很清楚。
是双波长的仪器还是在一个图谱上用两个波长来定性或计算？
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sdrbzou
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2011/11/17 13:58:43 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
双光束分光光度计
经单色器分光后经反射镜分解为强度相等的两束光，一束通过参比池，一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度，此比值即为试样的透射比，经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。
双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和样品池，还能自动消除光源强度变化所引起的误差。
双波长分光光度计
由同一光源发出的光被分成两束，分别经过两个单色器，得到两束不同波长1和2 的单色光；利用切光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸收池，然后经过光电倍增管和电子控制系统，最后由显示器显示出两个波长处的吸光度差值。对于多组分混合物、混浊试样（如生物组织液）分析，以及存在背景干扰或共存组分吸收干扰的情况下，利用双波长分光光度法，往往能提高方法的灵敏度和选择性。利用双波长分光光度计，能获得导数光谱。
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女人街连锁
y_haibo2008
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2011/11/18 10:53:41 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sdrbzou(sdrbzou) 发表:
双光束分光光度计
经单色器分光后经反射镜分解为强度相等的两束光，一束通过参比池，一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度，此比值即为试样的透射比，经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。
双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和样品池，还能自动消除光源强度变化所引起的误差。
双波长分光光度计
由同一光源发出的光被分成两束，分别经过两个单色器，得到两束不同波长1和2 的单色光；利用切光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸收池，然后经过光电倍增管和电子控制系统，最后由显示器显示出两个波长处的吸光度差值。对于多组分混合物、混浊试样（如生物组织液）分析，以及存在背景干扰或共存组分吸收干扰的情况下，利用双波长分光光度法，往往能提高方法的灵敏度和选择性。利用双波长分光光度计，能获得导数光谱。


好，其实简单说，目的都是一样，一束光是参照物！！
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524990103
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2011/11/18 16:48:36 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
对于多组分混合物、混浊试样（如生物组织液）分析，利用双波长分光光度计，往往能提高方法的灵敏度和选择性。

其中浑浊试样的浑浊程度对待测物质有没有影响呢？如果很浑，还有多种混合物，而待测物相对比较少。这样的结果是否可靠呢？
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2011/11/18 16:54:44 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夕阳(anping) 发表:
原文由 524990103(524990103) 发表:
在最大波长处吸光度的误差最小，那双波长光度计怎么保证它的准确性？


楼主的问题有些交代的不是很清楚。
是双波长的仪器还是在一个图谱上用两个波长来定性或计算？

在测试的时候，每个待测物质都有其最大吸收波长，而在选择波长的时候要考虑到两个波长在干扰物的吸收是一样的，又要考虑到待测物对两个波长的吸收强度差较大。那波长是怎么选择的？还有怎么保证结果的准确性？
不知道说的是否清楚
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夕阳
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2011/11/18 19:17:59 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 524990103(524990103) 发表:
原文由 夕阳(anping) 发表:
原文由 524990103(524990103) 发表:
在最大波长处吸光度的误差最小，那双波长光度计怎么保证它的准确性？


楼主的问题有些交代的不是很清楚。
是双波长的仪器还是在一个图谱上用两个波长来定性或计算？

在测试的时候，每个待测物质都有其最大吸收波长，而在选择波长的时候要考虑到两个波长在干扰物的吸收是一样的，又要考虑到待测物对两个波长的吸收强度差较大。那波长是怎么选择的？还有怎么保证结果的准确性？
不知道说的是否清楚


我明白了。楼主说的是双波长双光束的仪器。
双光束双波长的仪器与双光束单波长的仪器有这本质上的不同，双光束双波长的仪器的确适合于混浊液的测试，这其中的道理就是：混浊液的待测物质与背景物质的吸收波长有着很大的差别，如果不加以彻底扣除背景的影响就会使待测物质的可信度大打折扣。而双光束单波长的仪器不能很好的完成这一工作。
目前市面上，双光束双波长的仪器很少见到了，以前日立有一款仪器是这种类型的，型号为557型，估计目前很少有人使用啦！在我的记忆中，中科院理化技术研究所和上海医科大学各有一台557型的仪器。
这款仪器的外形图见下面所示：
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shenghuo0903
shenghuo0903
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2011/11/20 11:30:47 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一束通过参比池，一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度，此比值即为试样的透射比，经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。
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mengzhaocheng
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2011/11/20 21:21:42 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
相当于两束平行光。克服光强随时间的波动。
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