主题:【求助】更换柱子和流动相带来的问题

浏览0 回复10 电梯直达
rurub
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
现在和别组合用一台HPLC,但问题接连出现。

我的柱子是C18反向柱,分析物是RDX,流动相为WATER,METHANOL,ACN;

别组的柱子是正相柱,分析物是NTO,DNAN, NQ,流动相为ISO-OCTANE, ISO-PROPANOL, ISO-METHANOL+TFA

在别人做过实验后,我用ACN 10ml/min去冲洗流路10分钟,然后做自己的样品,最后我的两根柱子接连出现问题,No.1的RDX保留时间从7分钟向前漂移到4分钟,No.2的保留时间不但向前漂移,而且基线出现上下漂移很严重,影响整个分析。

我的问题是:
1)这两根柱子还有什么方法补救吗?虽然订了新柱子,但急需数据,估计等不到新柱子了

2)请老师提供些建议和方法来清洗流路(在别人用之后),除了清洗方法外还应该注意些什么(毕竟流动相和柱子全换),我现在了解的是清洗方法和洗针溶液的更换,但发现总有些别人的溶液残留在loop和connection里面,这样怎么清除呢?

3) No.2 柱子的保留时间往前漂移了,我还可以用来继续分析吗?





为您推荐
您可能想找: 气相色谱仪(GC) 询底价
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
知足常乐!
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 rurub 发表:
现在和别组合用一台HPLC,但问题接连出现。

我的柱子是C18反向柱,分析物是RDX,流动相为WATER,METHANOL,ACN;

别组的柱子是正相柱,分析物是NTO,DNAN, NQ,流动相为ISO-OCTANE, ISO-PROPANOL, ISO-METHANOL+TFA

在别人做过实验后,我用ACN 10ml/min去冲洗流路10分钟,然后做自己的样品,最后我的两根柱子接连出现问题,No.1的RDX保留时间从7分钟向前漂移到4分钟,No.2的保留时间不但向前漂移,而且基线出现上下漂移很严重,影响整个分析。

我的问题是:
1)这两根柱子还有什么方法补救吗?虽然订了新柱子,但急需数据,估计等不到新柱子了

2)请老师提供些建议和方法来清洗流路(在别人用之后),除了清洗方法外还应该注意些什么(毕竟流动相和柱子全换),我现在了解的是清洗方法和洗针溶液的更换,但发现总有些别人的溶液残留在loop和connection里面,这样怎么清除呢?

3) No.2 柱子的保留时间往前漂移了,我还可以用来继续分析吗?






1  你的柱子应该没什么问题,用甲醇和水交替着冲洗管路和柱子
2  在每次进样之前,用乙腈或者甲醇把进样口多洗几遍,进一针溶剂看有没有残留
3  保留时间变了,没有问题的,只要每次保留时间能稳定就可以了
happy王子矜
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
老多_小多
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
毛毛虫
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
先用甲醇冲一会,也有可能进气泡了,建议排一下气泡
〓猪哥哥〓
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
实验时压力有没有增大?
用你的两根柱子在其他仪器试试看其他的成分,看看有保留时间没有变化。
重复进样你现在的样品,看看重复性怎么样
huanke
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
梯度洗一遍,多洗一段时间,进样口是否脏了?检测时间延后应该没有太大影响,只要你这次做的时候都是这个时间出现行了
123angel
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
你的柱子应该没有什么问题,用乙腈和甲醇多冲冲就行
正相和反相之间交换最好多冲冲,我们一般都用异丙醇过渡,因为我们用正己烷做正相的流动相
还是你在过渡的时候冲洗不过
wsy18
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
从你介绍的情况看,是别组做完正相后清洗不够,然后你做反相前又未充分冲洗。建议二组协调一下,大家都增加做完后的冲洗时间(具体所需时长可试一下,这比下次做分析之前冲洗更重要),然后也相应增加分析前的平衡时间。
keiven
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 wsy18 发表:
从你介绍的情况看,是别组做完正相后清洗不够,然后你做反相前又未充分冲洗。建议二组协调一下,大家都增加做完后的冲洗时间(具体所需时长可试一下,这比下次做分析之前冲洗更重要),然后也相应增加分析前的平衡时间。

我这里有现货柱子提供
rurub
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
有道理,毕竟octane和water不溶,我们正在尝试用iso-propanol过渡,希望能够有好的效果。
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
品牌合作伙伴