主题：【讨论】实验室、QC问题-检定菌

我们以前要求是控制是2-4℃，买那种好的冰箱，能实现。
传代时间间隔长了有时是能发现影响菌种的活力的。最好不要超过二个月。
我们是用0.1%新洁尔灭和5%石炭酸消毒的。
废弃的培养物、带菌的实验用品以前也用过5%来苏尔煮沸40min灭菌的，效果也不错。
配一批做一次？更甚至，配一批灭菌一锅做一次，我们是这样做的，这样可以保证条件一致。对出现的问题比较容易做出判断。
每个无菌室应有独立的空气净化系统这个成本太高，很多都没有的。
紫外灯里里外外都要有的。配合喷雾，台面擦拭，对无菌室进行灭菌消毒，还要定期薰蒸灭菌。

原文由 mcds 发表:
我们以前要求是控制是2-4℃，买那种好的冰箱，能实现。
传代时间间隔长了有时是能发现影响菌种的活力的。最好不要超过二个月。
我们是用0.1%新洁尔灭和5%石炭酸消毒的。
废弃的培养物、带菌的实验用品以前也用过5%来苏尔煮沸40min灭菌的，效果也不错。
配一批做一次？更甚至，配一批灭菌一锅做一次，我们是这样做的，这样可以保证条件一致。对出现的问题比较容易做出判断。
每个无菌室应有独立的空气净化系统这个成本太高，很多都没有的。
紫外灯里里外外都要有的。配合喷雾，台面擦拭，对无菌室进行灭菌消毒，还要定期薰蒸灭菌。

2-4℃是需要做温场吧？？
传代时间的确得有个说法，不过没有找到这方面的文献。
如果配一批灭菌2锅以上，是做一次？还是每锅做一次，即2次以上？
如果做国外，最好无菌室独立净化，阳性室要负压。
单讲紫外灯灭菌这件事，开紫外时通风需要不需要开呢？？这个问题，能否详细解答一下？？

原文由 lingzhong 发表:
检定菌管理
● 检定菌的购入：不提倡企业直接从中国药品生物检定所购入冷冻干燥品（0代），自己复苏后接种。应直接由省级药品检验所购入斜面琼脂保存的菌种（1代），并了解所提供的菌种系第几代。
至于买0代还是买1代，其实无所谓，买1代的话，药品检验所会赚的更多。如果是进口菌种的话，要是有好几个单位共同买一支0代分装会便宜很多，毕竟单独买还是很贵的，但分装合不合法不是很清楚。
我们从省所买的可能是时机不好吧！怎么每次都至少是2代了……

● 检定菌保管：检定菌应专人管理，管理人员必须具备微生物基础知识，和一定的菌种保存经验。 保管人在收到检定菌后，应在保存容器外贴上标签，内容为：名称、编号、购买日期，并及时在检定菌领用台帐上登记。检定菌按储存条件，存放于4-6℃之间冰箱内保存，并加锁保管，做好温度记录。
标识是很重要的，4-6℃？？这个说法有问题吧？一般不都是2-8℃嘛......还有，要加锁哦~~~~

加锁很必要，我们冰箱控温2~8°C，这个还有温度记录吗？
● 检定菌的传代：检定菌传代次数不超过五代，从菌种保管中心获得的冷冻干燥的菌种为0代，冷冻干燥的原始菌种开启后转种至斜面琼脂为第1代，故企业的传代应从第二代开始，建议检定菌每月传代一次。
每月传代一次依据不可考............又是浪费钱..........

没有每月传代一次，买回来就是二三代了……
● 检定菌的使用：使用检定菌时，操作人员应按要求穿戴好工作衣帽、口罩，操作前后用肥皂洗手后，再用0.1%新洁尔灭浸泡影2分钟。发生菌液或培养液污染台面或地面时，应立即以3%来苏尔或5%石炭酸等消毒液倾覆其上，半小时再进行洗涤。工作衣帽受到菌液污染时应立即脱去，经热压灭菌后洗涤。
0.1%新洁尔灭、3%来苏尔、5%石炭酸或其他消毒液.......有吗？有的话，是不是照此执行呢？？呵呵.........

这种规定还是有的，新洁尔灭，来苏水是必备的，是要按照各自文件的方式执行的
●废弃物处理：废弃的培养物应经热压灭菌后洗涤，带菌的实验用品应浸泡于5%来苏尔溶液中，24小时后取出冲洗。效期已过的检定菌或检验后的带菌物品必须经过灭活处理后方可排入下水道。
其实只要材质可以，均可以121℃30min过灭后再处理。
先灭活再处理，一般都是湿热……

● 注意事项
（2）培养基应按购入批号分批作培养基灵敏度试验，并做好记录。药典上有规定的，按药典规定方法操作；如未规定则在第一次做生测试验时，多做一支阳性对照，作为培养基的灵敏度试验。
灵敏度试验啊............促生长............做起来好麻烦。这里是说按照购入批号，可问题是有的是干粉、也有是成品，成品也就算了，要是干粉该如何是好？毕竟，一批干粉可出好几批培养基啊，是不是隐含意思配一批做一次？更甚至，灭菌一锅做一次................

（3）2005年药品检验操作规程P316页讲到检定菌在4℃左右保存，我们认为不便操作，故还是要求在4-6℃之间保存。 P325页要求作微生物限度检查应有单独无菌室，每个无菌室应有独立的空气净化系统，企业可用通过全送全排、不回风来解决。P313页要求缓冲间和操作室设置紫外灭菌灯（2-2.5W/M3），还要求定期检查幅射强度，要求在操作面上达到40μW/cm2。我们认为此说法有待商榷，因为WHO在1992年对紫外线灭菌有明确规定：紫外线灭菌照射的高度小于2米，照射角度小于30 度，对需灭菌的对象照射时间应大于20分钟。生测的无菌室背景为万级，空气在无菌室停留的时间为3分钟，故本人认为，可以不设紫外灯。
4℃左右竟然理解为4-6℃！！不知道有卖这种冰箱、冷藏柜的厂家吗，汗一个！紫外灯还是设一个吧......换种思考，是不是紫外杀菌时应该是停止通风，把现有环境内的菌杀灭，30分钟后通风，默认进入的是无菌风。毕竟，超净台开紫外时就是不通风的。
有不符合现有标准、规定的，大家说说啊~~~~~
紫外灯的强度你们还测吗？我们可是直接用的。
4℃左右我认为可以理解成相对宽泛的温度，我们就是2-8℃

我们一般买干粉，自己复苏。

冰箱的确是大多2-8，从做温场的数据看，有时候2-8都很勉强，日常还是要放温度计记录温度的，至于湿度，好像没记，不好记啊。

你即使买的二三代，该传还是要传啊，除非你用一次就扔掉，但不可能啊，可以用五代的。

紫外灯我们也不测........看来紫外灭菌，我们大家只是凭理论进行，很少有量化进行的。我也搞不懂，难道只是凭日常监测结果来反证紫外的效果？