主题:【讨论】各位如何选择LC的流动相

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cherry_sun
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本人刚做液相不久,除了常用的甲醇、乙腈和水之外,还从未接触其他的流动相,经常看坛里的高手们讨论缓冲液,酸性还是碱性的流动相,本人是一头雾水,今天终于鼓起勇气发帖向各位请教。如反向柱(C18)一般都会在什么情况下接触什么流动相?还望各位不吝赐教啊。
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一般的物质用乙腈和水,甲醇和水,调节不同的比例就可以分析了,适当的时候,根据分离度情况,可以使用缓冲盐,调节PH值,改变物质在柱内的分配系数,从而达到更好的分离度
对于硅胶柱而言,物质显示酸性,可以在流动相中加乙酸,物质显示碱性,则可以加三乙胺,主要是抑制硅羟基的作用,防止峰拖尾
huaibeijiayuan
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还有磷酸,以及磷酸二氢钾、磷酸氢二钾等也可以改善峰型
柏坡
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缓冲盐主要是控制溶液PH及离子强度,从而改善色谱柱对样品的溶解性和分配比例,已实现对样品的分离。液夜色谱中,离子型色谱法和离子对色谱法经常用到缓冲盐,缓冲盐的使用可以用于分离过强的酸碱性物质,也有利于改善拖尾等情况。
senw
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原文由 cherry_sun 发表:
本人刚做液相不久,除了常用的甲醇、乙腈和水之外,还从未接触其他的流动相,经常看坛里的高手们讨论缓冲液,酸性还是碱性的流动相,本人是一头雾水,今天终于鼓起勇气发帖向各位请教。如反向柱(C18)一般都会在什么情况下接触什么流动相?还望各位不吝赐教啊。

采用什么缓冲体系,主要看你所分离物质的性质,如果是酸性物质,流动相的pKa要比其pKa小2以上,如果是碱性物质,流动相的pKa要比其pKa大2以上,这样的可以有效抑制物质的电离,避免产生拖尾等难分离现象。
〓猪哥哥〓
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主要还是由你的样品性质所决定的。

一般最常用的就是甲醇乙腈,水,酸。其他的根据需要再添加改善分离度和峰型。
fengxuemei
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这里有两个专门讨论的帖子,多关注下,共同学习了~~~
http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20090515/1891137/
http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20090515/1891132/
bluespider
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流动相的选择除了要根据柱子外,还得根据待分析的样品
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