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液相色谱（LC）

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主题：【求助】不同波长下HPLC重现性问题

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aiyi313

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发表于：2009/06/17 11:16:15 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

在使用HPLC时，虽然在不是最大吸收波长时，保留时间是保持不变的~~
但是我在不是最大吸收波长时，做了二次重新性特别不好，保留时间是不变的，但是纯度积分面积，一次85，一次45%，在最大吸收波长时是99%。那位大大可以给我解答下为什么？？？？？？

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2009/6/17 11:31:29 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 aiyi313 发表:
在使用HPLC时，虽然在不是最大吸收波长时，保留时间是保持不变的~~
但是我在不是最大吸收波长时，做了二次重新性特别不好，保留时间是不变的，但是纯度积分面积，一次85，一次45%，在最大吸收波长时是99%。那位大大可以给我解答下为什么？？？？？？

不在最大吸收波长，应该是考虑了该物质杂质的吸收波长而综合判定的。你在最大吸收波长的时候，主要杂质的吸收可能很小。会导致你归一化法的不准确性，重现性不好，是不是其他原因，色谱条件，积分参数，样品变化？
要是用外标法测含量的话，就可以选最大吸收波长，

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老多_小多

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2009/6/17 15:35:42 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

也许是重叠了杂质

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知足常乐！

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2009/6/17 15:36:25 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 aiyi313 发表:
在使用HPLC时，虽然在不是最大吸收波长时，保留时间是保持不变的~~
但是我在不是最大吸收波长时，做了二次重新性特别不好，保留时间是不变的，但是纯度积分面积，一次85，一次45%，在最大吸收波长时是99%。那位大大可以给我解答下为什么？？？？？？

仪器没有平衡好？检测器问题？样品不稳定？
就算是不在最大吸收波长，含量也不会变化这么多啊

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aiyi313

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2009/6/17 15:50:17 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 wenshaowei-2008 发表:
原文由 aiyi313 发表:
在使用HPLC时，虽然在不是最大吸收波长时，保留时间是保持不变的~~
但是我在不是最大吸收波长时，做了二次重新性特别不好，保留时间是不变的，但是纯度积分面积，一次85，一次45%，在最大吸收波长时是99%。那位大大可以给我解答下为什么？？？？？？

仪器没有平衡好？检测器问题？样品不稳定？
就算是不在最大吸收波长，含量也不会变化这么多啊

我这里是用的VWD的检测器这个样品还是比较稳定的~再说我在最大吸收波长时，重现性是特别的好的~·

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