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紫外可见分光光度计（UV）

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仪器社区 > 光谱 > 紫外可见分光光度计（UV）帖子详情

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主题：【求助】紫外的最大吸收峰的确定

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sophaloki

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发表于：2009/07/28 17:28:23 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

最近在做蛋白质，配制了一个浓度的蛋白质，波长扫描之后，发现280左右有一个小峰，最大吸收为280.
但是在200至260之间还有吸光度比较大的不过都是大于1的。
请问是吸光度在0.2至0.8之间的最大吸收吗？最近比较郁闷，搞不清楚！
或者给推荐一本紫外-分光光度计的书也可以，谢谢啦！

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2009/7/28 17:37:09 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

能把谱图传上来看看嘛，我帮你解决这个问题

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tutm

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2009/7/28 18:19:07 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

可以看这本“《紫外吸收光谱法及其应用》”

http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20080923/1501603/

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sophaloki

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2009/7/29 12:17:41 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 zhouyuhu 发表:
能把谱图传上来看看嘛，我帮你解决这个问题

图我已经上传了，麻烦帮我解释一下吧，真的一点不懂！

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sophaloki

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2009/7/29 12:18:15 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 tutm 发表:
可以看这本“《紫外吸收光谱法及其应用》”

http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20080923/1501603/

谢谢，非常感谢，准备打印出来学习下！

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tutm

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2009/7/29 16:23:51 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

你的图中显示的280nm那个峰就可以用来做定量分析了。

“最大吸收波长”一词，我认为完整点说应该是“仪器的测试波长范围内，该物质特征吸收峰的最大吸收波长”。

你写的测试中“吸光度在0.2至0.8之间”，那是仪器在此范围测试精度较高，因此一般这样要求。正常的仪器，我们大多数测试使用0.1-1范围，这样更方便些，精度也没问题。如果不在这个范围，则要调整样品浓度，使吸光度落于这个范围，以保证测试结果有足够的精度（有效数字）。

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ldgfive

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2009/7/31 14:19:42 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

200-260的部分是不能用的，很有可能是溶剂产生的

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auto1235

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2009/7/31 15:38:56 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

应该都可以测啦，只是280最准而已。

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sophaloki

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2009/7/31 17:46:43 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 ldgfive 发表:
200-260的部分是不能用的，很有可能是溶剂产生的

w我扫波长的时候，仪器提示扫描参比吗？请问这是怎么回事，以前用老的仪器没有这个提示过！扫描波长的时候是不是也要放参比，参比扫不扫描呢？

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tianru的爸爸

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2009/8/4 9:03:05 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 sophaloki 发表:
最近在做蛋白质，配制了一个浓度的蛋白质，波长扫描之后，发现280左右有一个小峰，最大吸收为280.
但是在200至260之间还有吸光度比较大的不过都是大于1的。
请问是吸光度在0.2至0.8之间的最大吸收吗？最近比较郁闷，搞不清楚！
或者给推荐一本紫外-分光光度计的书也可以，谢谢啦！

楼主被最大吸收峰的定义所限制了。
蛋白质要考虑最大吸收峰，是一个特征吸收峰，而不是要考虑其最大吸收时的吸收峰，所以蛋白质的最大吸收峰是不能低于260nm，因为在低于260nm时，会被自身的、溶液的吸收所干扰掉，找不到一个特定的吸收峰。
一般蛋白质在260nm附近处有一个峰谷，280nm附近有一个峰尖。

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2009/8/4 9:22:51 10楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 lxdongzi2003 发表:
原文由 sophaloki 发表:
最近在做蛋白质，配制了一个浓度的蛋白质，波长扫描之后，发现280左右有一个小峰，最大吸收为280.
但是在200至260之间还有吸光度比较大的不过都是大于1的。
请问是吸光度在0.2至0.8之间的最大吸收吗？最近比较郁闷，搞不清楚！
或者给推荐一本紫外-分光光度计的书也可以，谢谢啦！

楼主被最大吸收峰的定义所限制了。
蛋白质要考虑最大吸收峰，是一个特征吸收峰，而不是要考虑其最大吸收时的吸收峰，所以蛋白质的最大吸收峰是不能低于260nm，因为在低于260nm时，会被自身的、溶液的吸收所干扰掉，找不到一个特定的吸收峰。
一般蛋白质在260nm附近处有一个峰谷，280nm附近有一个峰尖。

学习了，非常感谢！

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