原文由 hmzhou83 发表:
很想知道你是怎么做胶原蛋白的圆二色的?
之前我也做过,但是胶原蛋白配制后就会形成类似软胶的状态,测试结果很不理想。不知你是怎么做的?
另外,圆二色的原始数据有吗?能给我看看吗?
将胶原溶液与Tris缓冲液混合,振动器混匀1分钟,立即取混合液置于仪器中测定圆二色光谱(预先设置好参数,并按一定的时间间隔重复测定)。附件中给出了3:49PM和4:42PM两个时间的圆二色光谱原始数据。
若胶原浓度配制适当的话,不会立即生成凝胶的(自组装)。另外,数据是采用鼠尾胶原(按文献方法提取)做的,改用美国进口胶原溶液做时,圆二色光谱变化不突出。做紫外光谱动力学实验时,新提取的鼠尾胶原凝胶化比较快,开始浊度就较高(A),即自组装较快,美国胶原自组装慢一些,紫外光谱曲线负峰前的平台较低。两种胶原都出现有负峰的阶梯形曲线。我们估计,美国胶原可能作过胶原两端的切除(酶切除?),新提取的胶原分子两端比较膨松,残基较多,可能是组装较快的原因,据说,胶原的抗原性主要在这两端。我们多次提取过鼠尾胶原,作用规律都一样。似乎反应活性比进口胶原溶液的活性高。
胶原自组装的圆二色原始数据