第四步:走基线1.把流动相放入HPLC托盘,并用封口膜把流动相管道密封于流动相瓶中,以防止流动相中有机系挥发。
2.按标准方法设置流速、波长、单针运行时间等仪器参数,并保存样品方法、运行方法,平衡系统。
在本步骤中应该注意:
此时水已运行约30-50min,已达到了我们的目的,即把色谱柱内原来的保存液替换为水,以防止原来的保存液和现在的流动相不相容,产生沉淀,损害色谱柱。
理论上平衡系统的时间大约为40min,或以基线是否平稳来判断。
延伸:
在设置方法时,我们要去编辑该药品的方法或直接调用该方法。这里存在一个仪器使用权限的问题。按照cGMP的要求,应该符合3级管理权限,即维护人员权限、管理员权限、操作员权限(有的地方可能介绍的是4级或5级分类,我们要学习的是这种管理仪器的理念。如果有高手清楚可以赐教,在此先感谢!)。操作人员只有调取方法的权限,是没有更改或新建方法方法权限的。仪器管理员有分配操作人员调用方法和更改不适用方法的权限。但我们在
液相上还很难做到这一点。但在我们新购入的TOC(总有机碳)测定仪上就实现了这个权限的分配。