主题:【讨论】flash色谱,你了解多少?

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flash色谱简介

1978年,Sill发明了FLASH色谱,文章发表在J.O.C上,从此FLASH色谱方法得以建立,新的设备也不断涌现,在国内,大连理工大学的彭勤纪教授自国外归国后,引进了该技术并进行了系统综述,发表在《化工进展》上,该文章首次将FLASH色谱译为“快速色谱”。狭义的快速色谱是指用压缩气体产生压力,加速流动相洗脱速度的低压短柱制备液相色谱系统,广义的快速色谱系统是指一切输液方式的中低压液相色谱系统。快速色谱有人还译为“闪式色谱”“FLASH色谱”。
经过20余年的发展,FLASH色谱已经广泛被人使用,成为常规的纯化分离设备,如葛兰素公司,辉瑞公司的研究人员都拥有数百套FLASH色谱装置,世界上也有多家仪器厂商提供全套的FLASH色谱装置。
FLASH色谱脱胎于开口玻璃柱色谱,主要用于天然产物,有机合成产物的分离纯化。古典的FLASH色谱由玻璃柱,贮液瓶,压缩空气调节阀组成,Aldricn公司,Baker公司都有相应的产品。该类型成本低,便于观察,但压力低,易破损。现在许多实验室在玻璃柱子顶端放置一个加压皮球,属于同类产品。经过改进,形成了经典FLASH色谱系统。由输液压力罐、流量调节阀、FLASH预装柱、上样装置组成,设备紧凑,压力高,使用方便,重现性高。经典的FLASH色谱仍使用气压加压,压力范围约0-7bar,柱长约15cm,填料粒度为40~60。可固体与液体上样,手工收集流分。
  最近,因为科研竞争的加剧与实验室人力成本的增长,要求更高的自动化程度与分离速度,产生了自动化FLASH色谱,装置带有柱、色谱泵、检测器、自动馏分收集器、工作站,有的仪器还有梯度洗脱系统与柱切换系统、自动进样系统,可自选优化条件,实现无人操作,极大的降低了人力成本,加快了开发速度。目前国内有人使用蠕动泵输液,用有机玻璃柱分离,严格上说不能于用有机相小分子分离,只能用于生化分离,否则会损坏仪器。
色谱用于制备,拥有以下优点:
1、速度快,一般为开口柱色谱分离时间的1/8,节省时间,样品变化分解慢
2、制备量大,比同样直径的HPLC制备柱,至少可多上一倍量样品。
3、成本低,首先仪器设备低于HPLC;其次,使用溶剂比玻璃柱节省,硅胶柱可多次使用,节省硅胶用量。
4、使用简单,不需要特殊溶剂处理,样品可以干法上样,人员不需要经过特殊培训。
色谱的效果主要取决于洗脱溶剂的优化与柱子装填效果,在处理与制备HPLC关系时,要遵循以下原则:
(1)能只用FLASH色谱时,就不用制备HPLC
(2)要先用FLASH色谱,纯化再用制备HPLC
其它的使用技巧还有:
①先用TLC选反溶剂、负载量
②使用短粗柱(直径:长度≤1:7)

flash色谱柱:

特点:
1.可用相位:C8, C18, Silica, NH2, CN, Alumina Acidic, Alumina Neutral, Alumina
2.尺寸:Biotage兼容12S, 12M, 40S, 40M, 40L, 65i, 75L, 75M, 75L, 150M and 150L
3.能够承受100ps的压强
flash色谱图:
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FLASH色谱是目前市场上比较火的中低压制备色谱的称呼。流速大部分在5-100ml/min,压力范围是0-100psi居多。中低压制备色谱较传统的柱层析的方法来说,制备的纯度大大提高,速度加快,更重要的是其人员可控制性加强,大部分都会有完善的工控软件,重现性大大提高。较高压制备的优势就是每次的制备量大大加大,试验时间缩短,提高劳动效率,而且耗材柱子的成本也很低,最大限度的节约实验生产成本。
    目前市场上流通的FLASH仪器大部分由五个部件组成,即二元梯度集成式泵系统,双波长紫外检测器,计算机工控系统(可触摸操作),馏分收集系统,上样装置。
    应用范围大部分是做药物化学提取物,植物提取物,蛋白纯化等等。
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