主题：【专题讨论第一期】进样前的阅兵

原文由 03yx2 发表:

原文由 yangshaobo 发表:

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原文由 yangshaobo 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
师兄指导我第一次使用液相，强调的最重要的一个环节就是换柱子时如何拆卸、安装柱子，再就是检测器不要经常开关。
2、你的开机顺序（注明仪器名称）是怎么样的？为啥是这样的？
用的是戴安的HPLC，好久不做了忘了具体型号，顺序是：打开泵，开始自检、洗泵，然后排气，然后打开检测器预热30min，打开变色龙工作站，设定流速、检测波长等，平衡基线，然后上样，做完样品用乙腈冲柱子。
3、对于不同样品采用不同的前处理方法，如蛋白，糖类，黄酮，生物碱等。你做的样品是什么，经过怎么样的处理之后进液相呢？
我们实验室做的是微生物活性物质的分离纯化，大多是一些多肽类物质，发酵液经硫酸铵盐析（或者大孔吸附树脂处理）、离子交换层析（或者分子筛层析、TLC）等处理，收集有效组分冷冻干燥后上HPLC，确定分离条件，再用制备液相制备，然后用NMRI测定其结构。

制备色谱，你们用的也是戴安的吗？

制备不是戴安的，是labtech的，毕业了，好久不做HPLC了所以具体型号忘了，呵呵。只记得价格好像是9w多点。

9W，不贵，不带检测器的价格吧，或许没有检测器？

原文由 yangshaobo 发表:

原文由 03yx2 发表:

原文由 yangshaobo 发表:

原文由 03yx2 发表:

原文由 yangshaobo 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
师兄指导我第一次使用液相，强调的最重要的一个环节就是换柱子时如何拆卸、安装柱子，再就是检测器不要经常开关。
2、你的开机顺序（注明仪器名称）是怎么样的？为啥是这样的？
用的是戴安的HPLC，好久不做了忘了具体型号，顺序是：打开泵，开始自检、洗泵，然后排气，然后打开检测器预热30min，打开变色龙工作站，设定流速、检测波长等，平衡基线，然后上样，做完样品用乙腈冲柱子。
3、对于不同样品采用不同的前处理方法，如蛋白，糖类，黄酮，生物碱等。你做的样品是什么，经过怎么样的处理之后进液相呢？
我们实验室做的是微生物活性物质的分离纯化，大多是一些多肽类物质，发酵液经硫酸铵盐析（或者大孔吸附树脂处理）、离子交换层析（或者分子筛层析、TLC）等处理，收集有效组分冷冻干燥后上HPLC，确定分离条件，再用制备液相制备，然后用NMRI测定其结构。

制备色谱，你们用的也是戴安的吗？

制备不是戴安的，是labtech的，毕业了，好久不做HPLC了所以具体型号忘了，呵呵。只记得价格好像是9w多点。

9W，不贵，不带检测器的价格吧，或许没有检测器？

加上紫外检测器才9w，可能是当时一次买了两台给优惠了点？呵呵具体我也不知道。

原文由 03yx2 发表:

原文由 yangshaobo 发表:

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原文由 hgycook 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
第一次接触应该是在学校了，当时好像是台岛津的10A，感觉很金贵的样子，老师做的示范，我们都看着。机器放置的房间比较好，整个空间都好像被毯子包裹起来了，呵呵。（是不是夸张了），老师说的最多的就是他那根进样针，总是强调它会弯调！再后来进了工厂，那时候才知道原来液相也能放在外面！

2、你的开机顺序（注明仪器名称）是怎么样的？为啥是这样的？
现在用的是岛津的机器，每天一开机后做的事就是purge，大概1个小时吧，然后才开始工作。

purge 1h，应该是平衡1h吧。

我记得purge 3min就差不多吧？呵呵

是的，1-3min即可

原文由 fcqxqyslzx 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
第一次使用液相是98年在学校做论文,因为仪器很金贵,没怎么让操作也就是扎了几针样品.后来到单位是一个老员工指导我使用的,强调的最多的就是细心\严格按规程做,可惜没3天就调岗给调走了,只能自己硬头皮到现在了

2、你的开、关机顺序（注明仪器名称）是怎么样的？为啥是这样的？
开机顺序是：其实没严格的顺序,检测器进样半小时开,工作站进样前开
关机顺序是：先关工作站，检测器.其他没要求.

原文由 LR2008_ONGI 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
第一次使用液相是师兄,说的最多的就是要细心,排气需开排气阀，做完样品冲柱子。

2、你的开、关机顺序（注明仪器名称）是怎么样的？为啥是这样的？
Agilent1200，先开泵，再开恒温箱，再进样前30min开灯源（节约），做样一结束，首先关检测器的灯（节约），再冲洗色谱柱。其目的就是延长氘灯的使用寿命。

3、对于不同样品采用不同的前处理方法，如蛋白，糖类，黄酮，生物碱等。你做的样品是什么，经过怎么样的处理之后进液相呢？
进样前都是要经0.45微米的滤膜过滤，后再进样。

原文由 hgycook 发表:

原文由 03yx2 发表:

原文由 yangshaobo 发表:

原文由 03yx2 发表:

原文由 hgycook 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
第一次接触应该是在学校了，当时好像是台岛津的10A，感觉很金贵的样子，老师做的示范，我们都看着。机器放置的房间比较好，整个空间都好像被毯子包裹起来了，呵呵。（是不是夸张了），老师说的最多的就是他那根进样针，总是强调它会弯调！再后来进了工厂，那时候才知道原来液相也能放在外面！

2、你的开机顺序（注明仪器名称）是怎么样的？为啥是这样的？
现在用的是岛津的机器，每天一开机后做的事就是purge，大概1个小时吧，然后才开始工作。

purge 1h，应该是平衡1h吧。

我记得purge 3min就差不多吧？呵呵

是的，1-3min即可

岛津20A 带自动进样器的 先是4个通道purge 每个5分钟 然后是自动进样器purge25min 前前后后加换流动相 也就1h小时吧。呵呵

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原文由 hgycook 发表:

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原文由 yangshaobo 发表:

原文由 03yx2 发表:

原文由 hgycook 发表:
1、谁指导我第一次使用液相，强调最重要的一个细节是什么？
第一次接触应该是在学校了，当时好像是台岛津的10A，感觉很金贵的样子，老师做的示范，我们都看着。机器放置的房间比较好，整个空间都好像被毯子包裹起来了，呵呵。（是不是夸张了），老师说的最多的就是他那根进样针，总是强调它会弯调！再后来进了工厂，那时候才知道原来液相也能放在外面！

2、你的开机顺序（注明仪器名称）是怎么样的？为啥是这样的？
现在用的是岛津的机器，每天一开机后做的事就是purge，大概1个小时吧，然后才开始工作。

purge 1h，应该是平衡1h吧。

我记得purge 3min就差不多吧？呵呵

是的，1-3min即可

岛津20A 带自动进样器的 先是4个通道purge 每个5分钟 然后是自动进样器purge25min 前前后后加换流动相 也就1h小时吧。呵呵

自动进样器purge，为什么呀？可以详细的介绍下吗？