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主题：【求助】酶反应液相检测前处理

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biocat
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发表于：2009/09/16 14:56:54 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
酶反应，产物为3-羟基丙酸，HPLC检测，有机酸柱，流动相为5mM硫酸。之前用10%硝酸使酶变性，离心后取上清进样，但是硝酸会产生一个很大的峰和产物峰重叠，请问该体系有什么合适的前处理方法去除酶么？谢谢！
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2009/12/6 9:17:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
3-羟基丙酸(3-hydroxypropionic acid,简称3-HP),又名β-羟基丙酸,是一种无色无味的油状液体,可与水、醇、醚等多种有机溶剂互溶。
乙酰辅酶A固定CO2之后还原而生成3-羟基丙酰辅酶A，该化合物可水解生成3-羟基丙酸。
美国Cargill公司利用玉米制得葡萄糖然后通过发酵制得3-羟基丙酸，其路径主要包括：从橙色绿曲挠菌中克隆有乳酰辅酶A脱水酶活性的多肽基因编码，从Homo sapiens(智人)中克隆有羟基丙酰辅酶A脱水酶活性的酶基因编码，前者将乳酰辅酶A脱水生成丙烯酰辅酶A，后者可催化丙烯酰辅酶A水合生成羟基丙酰辅酶A。羟基丙酰辅酶A在一定条件下脱去辅酶A生成羟基丙酸。Cargill公司同时还申请了与3-羟基丙酸相关的一些有机化合物的生物合成方法，如3-羟基丙酸酯、丙烯酸和聚羟基丙酸等。

您是在做类似的生物法制3-羟基丙酸的研究吗？，中止酶反应的方法很多，是不是可以试试别的化学试剂来代替硝酸？
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2009/12/6 9:20:08 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不知道这个文献有没有用，请参考。
三羟基丙酸循环.pdf
附件：
三羟基丙酸循环.pdf
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hujiangtao
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2009/12/15 7:49:43 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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