主题:【已应助】【求助】哪位大虾能告诉我为什么这样血浆前处理之后很黄啊

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chengying86128
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我做体内药物分析,血浆样品前处理步骤为血浆加入1M盐酸,然后加入乙酸乙酯,低速离心,再取上清吹干,再加入甲醇溶解,可是不知道为什么,溶解出的东西特别黄,与之前类似处理的结果不一样,感觉样品很杂很脏,哪位高人能告诉我是为什么啊?
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dark_wzy
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雾非雾
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原文由 dark_wzy 发表:
血浆在处理时是否有溶血?


一加盐酸肯定应该溶血了的。
chengying86128
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原文由 mcds 发表:
原文由 dark_wzy 发表:
血浆在处理时是否有溶血?


一加盐酸肯定应该溶血了的。

请问溶血会很黄吗,我的样品高速离心之后上清还是很黄,进质谱会不会有问题啊
dark_wzy
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溶血与加盐酸没有关系,血浆在处理时操作不当就会溶血。看处理之前血浆是否颜色发红~
小猪飞飞
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溶了血的血清应该是红色的。血清不经特殊处理是淡黄色的。用乙酸乙酯提取后直接吹干,并没有很好的除掉其中的杂质。估计您用于定容的甲醇的量也相当的少,黄颜色应该是正常的。可能是脂肪之类的物质。可以做个基质加标,看看基质效应有多大。

另外,还不是特别了解血清显黄色是因为确切包含了哪些物质
chengying86128
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原文由 zpf20031212 发表:
溶了血的血清应该是红色的。血清不经特殊处理是淡黄色的。用乙酸乙酯提取后直接吹干,并没有很好的除掉其中的杂质。估计您用于定容的甲醇的量也相当的少,黄颜色应该是正常的。可能是脂肪之类的物质。可以做个基质加标,看看基质效应有多大。

另外,还不是特别了解血清显黄色是因为确切包含了哪些物质

我吹干后是用甲醇溶的,那请问这样的话样品会不会很脏,可以进质谱吗
dickwang2008
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样品很黄是因为乙酸乙酯的极性相对较大,这样它就把血浆中的极性较大的内源性物质给提取出来,吹干复溶后就会显的比较脏。
楼主可以观察一下,如果很脏,你可以使用高速离心机再离心一下,然后就可以进质谱啦。
风之彩
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样品黄也没有多大的关系,关键是进样前一定要再高速离心一下。不同的前处理方式,用的试剂不同,出来的样品颜色可能会有差别,就是相同的方法不同的人的血浆颜色也会不同的。
zhufangwei
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你使用的是血浆,而不是血清,加盐酸会溶血啊,不过萃取柱有颜色很常见,上样前高速离心确保万一,看效果。不过自己做试验最好每一步都弄清楚比较好。
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Last edit by zhufangwei
sunyfox
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血浆里是没有红细胞的, 所以不是溶血问题。可能是乙酸乙酯把极性较大的内源性物质给提取出来,吹干复溶后就会显的比较脏。
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